dxy logo
首页丁香园病例库全部版块
搜索
登录

【日更】大鼠胎鼠神经干细胞悬浮培养情况(借此发现自己实验的问题并分享经验)

骨科医师 · 最后编辑于 2017-07-14 · IP 上海上海
6845 浏览
这个帖子发布于 8 年零 4 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。

【背景】第一次养神经干,讨到了三管冻存的P2代神经球,试着自己培养。第一管……恩算是练手了,本直播从第二管开始!            立贴求保佑神经干成球增殖保佑保佑!

【立贴目的】分享交流培养经验(作为一名小白,更多希望能向有经验的前辈们请教,改进自己的protocol。也希望自己的失败经验能帮到后人。本贴争取每日更新~~~~欢迎批评、指教、咨询、分享。但是请勿把本帖作为Protocol!!

——————————————说正经事儿专用分割线——————————————————————

【细胞信息】大鼠14.5天胎鼠的大脑组织

【培养基配方】——维持干性

Gibco     21103049    neurbasal培养基    

Gibco    12587010    B27 minus   VitA                2%

Gibco    35050061   Glutamax                             1%

Peprotech   400-29    Recombinant Rat FGF-basic     10-20 ng/ml

Peprotech   400-25    Recombinant Rat EGF-basic     10-20 ng/ml

Gibco    15140-122    青霉素链霉素                       1%

(可选)Heparin    5ug/ml(这个我第一次加过一次,感觉没啥效果,据说是为了延长因子的寿命,反正请教过很多人,也有不少说不加的,所以我就没加)

【培养容器】

NEST untreated 6孔板

这个吧,因为之前用TC处理的瓶子、皿、板都发生了贴壁的问题,所以费尽功夫找到了untreated的培养容器,效果怎么样还不知道,过几天应该就能有结果。

【培养方式】

悬浮培养…………不能贴壁,贴壁了就不增殖了。。。

——————————————以上为基本信息,下一贴说第一天的故事(今天)——————————————

32 43 3

全部讨论(0)

默认最新
avatar
32
分享帖子
share-weibo分享到微博
share-weibo分享到微信
认证
返回顶部