浅谈生物类似药制造与检定规程----13号资料。。。

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实在不好意思啊！拖了这么久才有空坐下来写，感谢版主没有删除此帖。

先来个大概目录。供新手参考，请老司机吐槽，指正。谢谢！

一、制造和检定规程草案

1 定义

2 生产制造规程

2.1 基本要求

2.1.1 设施与生产质量管理

按中国《药品生产质量管理规范》要求实施。

2.1.2 原料及辅料

应符合现行《中国药典》或《中国生物制品主要原辅材料质控标准》的要求。

未纳入上述标准的化学试剂，应不低于化学纯。

2.1.3 生产用水

生产用水源水应符合国家饮用水标准；纯化水及注射用水应符合现行《中国药典》标准。

2.1.4 生产用器具

直接用于生产的金属或玻璃等器具，应经过严格清洗及去热原物质处理或灭菌处理。

2.2 工程细胞

2.2.1 工程细胞名称及来源

2.2.2 细胞库建立、传代及保存

2.2.3 主细胞库及工作细胞库的检定

新建细胞库应符合2015年版《中国药典》三部“生物制品生产检定用动物细胞基质制备及检定规程”规定。

2.2.3.1 细菌和真菌检查

2.2.3.2 支原体检查

依法检查（2015年版《中国药典》通则3301），应符合规定。

2.2.3.3 病毒检查

依法检查（2015年版《中国药典》三部“生物制品生产检定用动物细胞基质制备及检定规程”），应符合规定。

2.2.3.4 细胞鉴别试验

应用形态特征和同工酶分析进行鉴别，应为典型CHO细胞。在倒置显微镜下可见细胞呈椭圆形或圆形，边缘清晰。

2.2.3.5 目的基因表达框架检测

应用分子生物学方法对各级细胞库提取的基因组进行PCR扩增目的DNA，然后进行DNA测序，目的基因核苷酸序列应与批准的序列相符。

2.2.3.6 抗体表达量测定

2.3 原液

这个部分我们当时写得很简单，后来现场核查的老师提醒我们说，还是应该写得更详细一些的，尤其是一些关键的控制点的参数范围什么的。

2.3.1 细胞的复苏与扩增

2.3.2 生产用培养基

2.3.3 细胞培养

2.3.4 分离纯化

2.3.4.1 深层过滤

2.3.4.2 蛋白A亲和层析

2.3.4.3 低pH减病毒

2.3.4.4 离子交换层析

2.3.4.5 离子交换层析

2.3.4.6 膜过滤去病毒

2.3.4.7 浓缩换液

2.3.5 原液制备

2.3.6 原液的保存

2.4 原液检定

按照3.1项目进行。

2.5 成品

2.5.1 分批

应符合2015版《中国药典》“生物制品分批规程”规定。

2.5.2 分装

应符合2015年版《中国药典》“生物制品分装和冻干规程”及通则0102有关规定。

2.5.3 规格

2.5.4 包装

2.6 成品检定

按照3.2项目进行。

3 质量检定规程

下面就是release test，根据你自己的产品具体而定，我当时是参照2015版药典的尼妥珠单抗的结构顺序写的，如果完全按照药典做的，那可以就写“依法检定，2015版药典通则xxxx”，如果并非完全按药典执行的，那就写上一些关键参数吧，比如流动相，以及比例，色谱柱等等，这里千万不要乱写，你做过验证的，才可以写，没验证的就不要写。

3.1 原液检定

3.1.1 鉴别试验

3.1.1.1 紫外光谱

3.1.1.2 非还原型SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳

3.1.1.3 分子量

3.1.1.4 等电点

3.1.1.5 肽图

3.1.1.6 N端氨基酸序列（至少每年测定1次）

3.1.2 pH值

3.1.3 纯度和杂质

3.1.3.1 高效液相色谱法

3.1.3.2 毛细管凝胶电泳法（CE-SDS）

3.1.3.3 蛋白质A残留量

3.1.3.4 宿主DNA残留量

3.1.3.5 宿主细胞蛋白质残留量

3.2.3.6 聚山梨酯含量

3.1.4 生物学活性

3.1.5 蛋白质含量

3.1.6 细菌内毒素检查

3.2 成品检定

3.2.1 鉴别试验

3.2.2 理化检定

3.2.2.1 外观

3.2.2.2 溶液的澄清度

3.2.2.3 可见异物

3.2.2.4 不溶性微粒

3.2.2.5 装量

3.2.2.6 pH值

3.2.2.7 渗透压摩尔浓度

3.2.3 纯度和杂质

3.2.3.1 高效液相色谱法

3.2.3.2 毛细管凝胶电泳法（CE-SDS）

3.2.3.3 聚山梨酯含量

3.2.4 生物学活性鉴别

3.2.5 蛋白质含量

3.2.6 无菌检査

3.2.7 细菌内毒素检查

3.2.8 异常毒性检查

4 保存、运输及有效期

5 使用说明

二、制造和检定规程草案起草说明

逐一说明

三、检定方法标准操作规程

不是完全按药典执行的方法，均应该附上sop。

四、检定方法验证资料

我公司依据《药品质量标准分析方法验证指导原则》对以下13个检定方法验证进行了系统的方法学验证，13个方法全部通过方法学验证，可以用于xxxx产品生产过程质量控制、产品放行检测、产品稳定性研究等质量分析。

附件：毛细管等电聚焦电泳法（cIEF）验证报告

附件：反相液相色谱法（RP-HPLC）验证报告

附件：分子排阻液相色谱法（SEC-HPLC）验证报告

附件：阳离子交换液相色谱法（CEX-HPLC）验证报告

附件：还原蛋白毛细管电泳法（R CE-SDS）验证报告

附件：非还原蛋白毛细管电泳法（NR CE-SDS）验证报告

附件：Protein A残留量检测（ELISA法）验证报告

附件：CHO细胞DNA残留量测定（qPCR法）验证报告

附件：CHO HCP残留量检测（ELISA法）验证报告

附件：活性检测验证报告

附件：浓度测定（紫外分光光度法）方法学验证报告

附件：细菌内毒素检查干扰试验报告

附件：紫外可见分光光度法（UV-Vis）测定吐温含量验证报告