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石蜡包埋切片之后组织易碎或者展开不好免疫组化/荧光染色

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楼主

libook111

入门站友

1楼

这个帖子发布于4年零97天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。

大家好，我想请教一个关于石蜡包埋切片的问题：

我做了两次小鼠大脑海马部位全脑包埋，包埋的脱水时间75 95 100醇各两次，每次半小时。二甲苯透明不到20min（因为害怕透明太过），石蜡共两道每道1小时。石蜡的温度在60度左右。切片时切的片子是卷曲的。放到39度水中展开时，没等展开组织就分开了，碎了。有时候也能切到好的片子，仅仅最开始一张或者两张，但是组织还是易碎。我看同学切的也是卷曲的片子但是他们的能展开。是不是因为二甲嫩透明的时间不够或者石蜡浸泡的时间不够呢？

我试着用这个片子染色 GFAP能染出来，但是其他蛋白就染不出来了。

还有就是我在抗原修复的这一步，片子特别容易脱片，我的修复液是枸橼酸修复液 10x的，配液的时候PH调了6.但是稀释到1X时PH变成了6.54.这种情况是不是需要再把1x的修改液PH调到6呢？但是其他人用的时候直接稀释液没有测PH，也能做出来。

还有就是一抗4度过夜之后需要复温半小时吗？还是拿出来了之后就洗呢？

问题有点多，谢谢大家！

急求解答！

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2016-10-20 09:28 浏览 : 4587 回复 : 4

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