sgRNA插入时如何插入U6启动子和支撑序列？
这个帖子发布于 9 年零 37 天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
各位前辈好，最近被Crispr虐的要吐血了。好不容易学会设计sgRNA，被告知还需要插入U6启动子和sgRNA的支撑序列，求助以下问题：
1. 如何判断是否需要插入启动子？
2. 如何查找U6启动子的序列（人）?
3.支撑序列是什么，是下游序列么？该如何构建呢？
4.三者是需要连在一起做成一对双链，然后加粘性末端，再一起插入质粒中么？
万分感谢各位的帮助！
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