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植物与农林科学

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SSR毛细管电泳结果怎么读条带,用什么软件?

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楼主 王磊314
王磊314
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这个帖子发布于4年零221天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。

各位大神帮帮忙啊!最近在做SSR,二倍型的,应该读哪个条带呢?我现在用的是Genemarker,但是这个软件好像不能分析SSR,那应该用什么软件呢?这是我的几个结果,麻烦大神帮我看看哪个是主峰,743、219和712引物我试着读了几个主峰,不知道对不对。


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2016-07-28 18:09 浏览 : 8001 回复 : 5
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楼主 王磊314
王磊314
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没人看吗?自己顶一下,各位大神帮帮忙啊,SSR 和STR的分析方法相同吗?
2016-07-29 08:42 来自 Android客户端
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1、SSR就是STR,同物异名,因此,处理STR的软件理论上也能处理SSR

2、743和050的主峰明显,判读应该是正确的,但其余的位点特异性较差,且有较严重的stutter峰干扰,较难判读。建议先做一下扩增的优化,看能不能改善。推荐的优化方案包括touchdown、梯度、适当提高引物复性的严谨度等。如果仍然不能改善的话,估计只能重新设计引物了。

3、主峰判读是否正确,除了峰型本身比较清爽外,还要结合理论预测进行判读。正常情况下,主峰不应该偏离理论预测的位置太远。由于不同仪器、不同染料标记,主峰偏离理论预测的位置±2~5bp应该是可以接受的。

4、请参见我以前的答疑帖:【求助】STR 毛细管电泳特异峰分析 [精华]  http://www.dxy.cn/bbs/topic/25832838,希望对你的工作有所帮助。

2016-07-31 10:28
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严重的stutter峰,不好判读。建议你优化一下扩增条件,实在不行只能选择其他的多态位点

可以参考:http://www.gene99.com/serviceShow.aspx?cid=12&id=154

2016-08-09 17:06
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