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克隆植物中关键酶基因，PCR中需要的引物是RNA引物还是DNA引物

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楼主

fanlingling

入门站友

1楼

这个帖子发布于3年零130天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。

求助，各位大神。本人刚涉及分子生物这个领域，太多不懂，望各位大神不吝赐教。

实验大致方案是总RNA提取、cDNA合成、酶克隆、全长cDNA克隆、功能表达、RT-PCR、生物信息分析等。

主要困惑是，我提取了RNA接下需要反转录为cDNA，反转录试剂盒也以及买了。克隆目的基因需要设计引物，但是不知道究竟是RNA引物还是DNA引物。另外我先按照RNA引物设计，发现基因的全序列中有一部分为红色CDS区，有师哥指导说直接用CDS区去设计就可以。但是由于我做的是植物的有几个基因在NCBI中查找不到，所有没法直接用CDS区区设计引物。可能是在这个植物里还没有做这个基因吧（知识猜测），因此比较困惑是不是该像设计DNA引物那样，找所有有关基因然后Clustal X对比，找保守序列呢？呢这样会不会不准确呢？求各位赐教，谢谢，不胜感激

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2016-07-05 09:29 浏览 : 13716 回复 : 0

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