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新生小鼠神经元培养

神经外科医师 · 发布于 2016-06-12 · IP 云南云南
1.2 万 浏览
这个帖子发布于 9 年零 157 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。

开始培养新生小鼠神经元,希望大家多多指点!

看过holywater大神的帖子,但之前已有实验方法,就按照老师的来。

实验动物:24H内新生C57小鼠

方法:解剖取脑,新生小鼠脑太小不好分离,只去小脑,剥离脑膜,剪碎,木瓜蛋白酶2MG/ML消化20min,接着加血清中止反应,用1ml*头吹打数次,100um滤网过滤,然后用neurobasal

洗涤两次,离心去上清,最后完全培养基重悬,计数,按约3*10的5次方接种于35mm培养皿。

现在的问题是细胞分不开,成团太多,第6天换液后就开始死亡,不知道是不是细胞太密还有消化不好,下步准备换70um滤网,还有只要脑皮层,DNA酶贵就暂时不试了。

接种时

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第二天

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第六天,可以看到神经元形态

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第9天,大量死亡

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