新生小鼠神经元培养
开始培养新生小鼠神经元,希望大家多多指点!
看过holywater大神的帖子,但之前已有实验方法,就按照老师的来。
实验动物:24H内新生C57小鼠
方法:解剖取脑,新生小鼠脑太小不好分离,只去小脑,剥离脑膜,剪碎,木瓜蛋白酶2MG/ML消化20min,接着加血清中止反应,用1ml*头吹打数次,100um滤网过滤,然后用neurobasal
洗涤两次,离心去上清,最后完全培养基重悬,计数,按约3*10的5次方接种于35mm培养皿。
现在的问题是细胞分不开,成团太多,第6天换液后就开始死亡,不知道是不是细胞太密还有消化不好,下步准备换70um滤网,还有只要脑皮层,DNA酶贵就暂时不试了。
接种时
第二天
第六天,可以看到神经元形态
第9天,大量死亡




















































