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细胞学与信号转导

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论坛首页  >  细胞生物学和信号转导版   >  细胞结构
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细胞支原体清除的方法

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这个帖子发布于5年零17天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。

下面是支原体污染检测方法,可以自己合成引物(见下
图)或购买相关试剂盒(http://www.genloci.com/Product.aspx?CateId=250
&Id=135),去检测细
胞是否有支原体污染。



支原体污染后,细胞一般会出现以下特征:

细胞状态变差,生长变慢,在显微镜下观察可能会有小黑点,但培养基一般不发生 浑
浊。细胞传代以后就出现细胞间黑点,细胞空泡化,很多类似凋亡、坏死的细胞,最终
细 胞漂浮,完全死亡。

支原体清除方法选择:

1. 抗生素类产品:抗生素可以抑制细菌细胞壁及蛋白合成,支原体没有细胞壁,而且
对细胞生长有一定影响,所以不建议用抗生素杀支原体。



2. 抗菌肽产品:抗菌肽产品杀支原体,是利用物理的方式,支原体和细菌表面带
有正电荷,我们的抗菌肽表面带有负电荷,通过电荷间的引力作用,抗菌肽和支原体特
异性结合,通过细胞膜的融合作用,可以在支原体表面类似打孔的方式,使得支原体裂
解死亡。正常3天可以完全清除支原体污染

代表产品:genloci公司的MycoplasmaOUT(tm) Treatment
(http://www.genloci.com/Product.aspx?CateId=240
&Id=132)

3. 物理加热:有些国产血清写着建议灭活,其实是挂羊头卖狗肉, 56度加热30
分钟更多的是为了杀支原体。实际上还有很多杀不死的。但可以降低产品支原体等微生
物污染风险。

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2016-02-16 15:15 浏览 : 12332 回复 : 10
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janhwa74
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用青霉素对付支原体是不行的,但是还有一些抗生素可选择性作用于原核细胞的DNA复制和蛋白质合成,并不会影响到真核细胞的生长,所以不能对抗生素一棍子全打死哦。


推荐炎熙生物的支原体清除剂,采用双重杀菌机制,不易产生耐药性,可除去胞内的支原体,不反复感染,很好用的。

www.biothrive.cn


2016-04-22 23:54
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janhwa74 编辑于 2016-05-05 00:40
  • • 2020年西综254分-现在不算晚(之前的手机号登不上去了)
hhjii10
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可以去看看丁香通的支原体清除试剂,丁香通官方的东西,还能免费申领

   



2016-07-28 14:27
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支原体简介

 

支原体(mycoplasma):又称霉形体,为目前发现的最小的最简单的原核生物。支原体细胞中唯一可见的细胞器是核糖体(支原体是原核细胞,原核细胞的细胞器只有核糖体)。

支原体是在1898年发现的,又称人形支原体,是一种简单的原核生物。其大小介于细菌和病毒之间。结构也比较简单,多数呈球形,没有细胞壁,只有三层结构的细胞膜,故具有较大的可变性。支原体的大小为0.2~0.3um,可通过滤菌器,常给细胞培养工作带来污染的麻烦。菌落小(直径0.1~1.0mm),在固体培养基表面呈特有的"油煎蛋"状。无细胞壁,不能维持固定的形态而呈现多形性,对渗透压敏感,对抑制细胞壁合成的抗生素不敏感。

 



 

 

关于细胞(特别是传代细胞)在培养过程中被支原体污染,这是一个世界性的问题。国内外研究表明,95%以上污染细胞的支原体属于以下四种类型:口腔支原体(M.orale)、精氨酸支原体(M.arginini)、猪鼻支原体(M.hyorhinis)和莱氏无胆甾原体(A.laidlawii,此种支原体为牛源性)。这是四种最常见的污染细胞的支原体菌群,但实际中能够污染细胞的支原体的种类是很多的。国外的调查证明,有二十多种支原体可以污染细胞,并且有的细胞可以同时被两种以上的支原体污染。

 

 

支原体是最小的可体外生长的微生物,可长期与宿主细胞共同生长,不产生急性细胞毒作用,在实验中容易被忽视。目前在细胞培养过程中有70%以上都存在支原体污染的情况。细胞受到支原体污染后不仅会影响细胞内某些基因的表达,也会在一定程度上影响细胞的生长状态。支原体污染的来源包括工作环境的污染、操作者本身的污染(一些支原体在人体是正常菌群)、培养基的污染、污染支原体的细胞造成的交叉污染、实验器材带来的污染和用来制备细胞的原始组织或器官的污染。

 

在细胞培养过程中应当定期做支原体检测,万一细胞已受支原体污染时,最佳的处理原则为将细胞高压灭菌后丢弃,以免污染其它洁净的细胞株。但是若受污染的细胞比较珍贵,必须去除支原体污染,则可以通过混合使用抗生素以达到目的。支原体没有细胞壁的,传统的抗生素一般对其无效。培养细胞支原体污染虽然不对细胞产生急性毒性作用,但可使细胞性状发生改变而影响细胞脂质体的转染和病毒对靶细胞的感染。包装细胞与靶细胞支原体污染的有效清除能明显改善病毒包装时的转染效率及靶细胞感染效率。

丁香园----抗支原体  免费申领


2016-08-09 11:43
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