【专题讨论】（Western 及抗体）超强技术支持，有问题只管问！ [精华]

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christine15

入门站友

2832楼

我想问一下，一抗跟二抗放了-80几天会不会有问题。说明书上都是说放-20的。但是因为实验室停了几次电，因此放了-80保温几次。现在刚做了之后连以前做有条带的都没有条带了。是什么问题呢？？

2008-08-30 20:33

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daduadua

常驻站友

2833楼

偶也来看看，谢谢啦，呵呵

2008-08-31 08:23

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shengx

常驻站友

2834楼

现在刚刚开始做western blot，内参做出来了，可是目的条带始终没有出来，一抗是进口原装的。我的电泳胶是glysine-SDS-PAGE胶，12.5%分离胶，5%积层胶，考马斯亮蓝染色在17KD以上的蛋白条带很好，条带之间非常清楚，可是17KD以下蛋白的跑不出来或者很模糊，而我的目的蛋白14.4KD，为什么呢？电泳积层胶75v,分离胶100V。并且，全部western体系可以做出43kd的内参啊。急求原因啊。另外我使用裂解液中加入了PMSF、EDTA、Aprotinin，什么原因引起这个的呢？有什么特殊注意的嘛？感激不尽！我给你邮件发不出去。

2008-09-14 13:01

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ljz2013

常驻站友

2835楼

请问有没有将胰岛素用荧光素标记的方法，有没有试剂盒。谢谢

2008-11-27 13:39

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