dxy logo
首页丁香园病例库全部版块
搜索
登录

【原创】【精华】条件性基因敲除(flox)小鼠繁育策略

医疗行业从业者 · 最后编辑于 2022-10-09 · IP 北京北京
18.9 万 浏览
这个帖子发布于 9 年零 362 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
条件性基因敲除(flox)小鼠繁育策略
Mating Strategy forConditional Knock-Out (flox) Mouse
上海南方模式生物研究中心技术顾问周效华
[深夜吐血整理,有一无二]
? Mating Strategy
l How to make a choice in Cre Zoo
l How to do the mouse breeding
l How to do the mouse genotyping


l How to make a choice in Cre Zoo
“Cre-zoo” 工具鼠库之广泛——Flp;EIIa-cre;UBC-cre/ERT2
“Cre-zoo” 工具鼠库之肝脏——Alb-cre;Alb-CreERT2
“Cre-zoo” 工具鼠库之神经系统——Camk2a-cre;Camk2a-cre/ERT2
“Cre-zoo” 工具鼠库之神经系统——Gfap-cre;Nes-cre;Nes-cre/ERT2;
“Cre-zoo” 工具鼠库之神经系统——Drd1a-cre;Drd2-cre
“Cre-zoo” 工具鼠库之生殖——Amhr2-Cre;Prm-Cre;Amh-cre;Lcn5-Cre
“Cre-zoo” 工具鼠库之脂肪——Fabp4-cre
“Cre-zoo” 工具鼠库之视网膜——Vsx2-cre
“Cre-zoo” 工具鼠库之胰岛——Ins2-cre;Ins2-cre/ERT
“Cre-zoo” 工具鼠库之肠——Vil1-cre
“Cre-zoo” 工具鼠库之乳腺——MMTV-cre
“Cre-zoo” 工具鼠库之心肌、骨骼肌——Myh6-MerCreMer; Ckmm-cre
“Cre-zoo” 工具鼠库之内皮Tek-cre
“Cre-zoo” 工具鼠库之上皮细胞CYP1A1-Cre
“Cre-zoo” 工具鼠库之肺上皮细胞——SFTPC-rtTA/tetO-cre
“Cre-zoo” 工具鼠库之T细胞——Lck-cre/Cd4-cre
“Cre-zoo” 工具鼠库之B细胞——CD19-Cre
“Cre-zoo” 工具鼠库之骨髓细胞——Lyz2-cre
“Cre-zoo” 工具鼠库之树突DC 细胞——Itgax-cre
“Cre-zoo” 工具鼠库之发育(干扰素响应)——Mx1-cre
“Cre-zoo” 工具鼠库之造血干细胞,骨髓——Ly6a-CreERT
“Cre-zoo” 工具鼠库之胚胎和干性细胞——Pou5f1-CreERT
“Cre-zoo” 工具鼠库之四肢——Shh-cre/ERT2
……
























具体信息请参考附件文件,欢迎无私捐赠或交换

l How to do themouse breeding
条件性基因敲除小鼠去Neo繁育
条件性基因敲除小鼠转为全身性基因敲除繁育

  1. F1代杂合(未去Neo或去Neo)flox小鼠(Gene Xflox-Neo/+ or Gene Xflox/+ );
  2. 与全身表达(Flp或EIIa-Cre)小鼠交配(去除neo基因或指定外显子);
  3. 与野生型小鼠交配去除(Flp或EIIa-Cre)基因。
  4. 具体图示请参考附件文件

    条件性基因敲除小鼠繁育准备

    1. F1代杂合(去Neo)flox小鼠(Gene Xflox/+ )自交获得纯合flox小鼠(Gene Xflox/flox )。
    2. F1代杂合(去Neo)flox小鼠(Gene Xflox/+ )与组织/细胞特异表达Cre小鼠交配获得杂合(去Neo)flox,Cre阳性小鼠(Gene Xflox/+;Cre+)。
    3. 具体图示及原理请参考附件文件

      l How to do the mouse genotyping
      具体图示及原理请参考附件文件

      繁育计划

      1. Cre和flox是否连锁?
      2. 是否只需雄性小鼠?
      3. 是否必须同窝对照?
      4. 如何根据繁育目标推演制定合理的繁育计划?
      5. 举例:
        按条件敲除方案一,确认不连锁,如最终需要10只flox/flox;Cre雄性同窝小鼠,那么至少要出生80只(事实上可能需要120-160个)以上小鼠,至少需要24-32只母鼠同时怀孕。
        繁育管理

        1. Excel 表格(具体表格模板请参考附件文件)
        2. 专业管理系统

















How to do the flox mouse breeding and genotyping-Biomodel,SH-Xiaohua Zhou.pdf (3.95 MB)
How to do the flox mouse breeding and genotyping--Biomodel,SH-Xiaohua Zhou-Word.pdf (346 KB)
[基因名]小鼠繁育记录表-2015-00-00.xls (42 KB)
152 968 132

全部讨论(0)

默认最新
avatar
152
分享帖子
share-weibo分享到微博
share-weibo分享到微信
认证
返回顶部