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【原创】【精华】条件性基因敲除(flox)小鼠繁育策略

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常驻站友

1楼

这个帖子发布于4年零139天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。

条件性基因敲除(flox)小鼠繁育策略Mating Strategy forConditional Knock-Out (flox) Mouse上海南方模式生物研究中心技术顾问周效华[深夜吐血整理，有一无二]? Mating Strategy
l How to make a choice in Cre Zoo
l How to do the mouse breeding
l How to do the mouse genotyping

l How to make a choice in Cre Zoo
“Cre-zoo” 工具鼠库之广泛——Flp；EIIa-cre；UBC-cre/ERT2
“Cre-zoo” 工具鼠库之肝脏——Alb-cre；Alb-CreERT2
“Cre-zoo” 工具鼠库之神经系统——Camk2a-cre；Camk2a-cre/ERT2
“Cre-zoo” 工具鼠库之神经系统——Gfap-cre；Nes-cre；Nes-cre/ERT2；
“Cre-zoo” 工具鼠库之神经系统——Drd1a-cre；Drd2-cre
“Cre-zoo” 工具鼠库之生殖——Amhr2-Cre；Prm-Cre；Amh-cre；Lcn5-Cre
“Cre-zoo” 工具鼠库之脂肪——Fabp4-cre
“Cre-zoo” 工具鼠库之视网膜——Vsx2-cre
“Cre-zoo” 工具鼠库之胰岛——Ins2-cre；Ins2-cre/ERT
“Cre-zoo” 工具鼠库之肠——Vil1-cre
“Cre-zoo” 工具鼠库之乳腺——MMTV-cre
“Cre-zoo” 工具鼠库之心肌、骨骼肌——Myh6-MerCreMer; Ckmm-cre
“Cre-zoo” 工具鼠库之内皮Tek-cre
“Cre-zoo” 工具鼠库之上皮细胞CYP1A1-Cre
“Cre-zoo” 工具鼠库之肺上皮细胞——SFTPC-rtTA/tetO-cre
“Cre-zoo” 工具鼠库之T细胞——Lck-cre/Cd4-cre
“Cre-zoo” 工具鼠库之B细胞——CD19-Cre
“Cre-zoo” 工具鼠库之骨髓细胞——Lyz2-cre
“Cre-zoo” 工具鼠库之树突DC 细胞——Itgax-cre
“Cre-zoo” 工具鼠库之发育(干扰素响应)——Mx1-cre
“Cre-zoo” 工具鼠库之造血干细胞，骨髓——Ly6a-CreERT
“Cre-zoo” 工具鼠库之胚胎和干性细胞——Pou5f1-CreERT
“Cre-zoo” 工具鼠库之四肢——Shh-cre/ERT2
……
具体信息请参考附件文件，欢迎无私捐赠或交换
l How to do themouse breeding
条件性基因敲除小鼠去Neo繁育条件性基因敲除小鼠转为全身性基因敲除繁育

F1代杂合(未去Neo或去Neo)flox小鼠（Gene X^flox-Neo/+ or Gene X^flox/+）；
与全身表达（Flp或EIIa-Cre）小鼠交配（去除neo基因或指定外显子）；
与野生型小鼠交配去除（Flp或EIIa-Cre）基因。

具体图示请参考附件文件

条件性基因敲除小鼠繁育准备

F1代杂合(去Neo)flox小鼠（Gene X^flox/+）自交获得纯合flox小鼠（Gene X^flox/flox）。
F1代杂合(去Neo)flox小鼠（Gene X^flox/+）与组织/细胞特异表达Cre小鼠交配获得杂合(去Neo)flox，Cre阳性小鼠（Gene X^flox/+;Cre⁺）。

具体图示及原理请参考附件文件

How to do the mouse genotyping

具体图示及原理请参考附件文件

繁育计划

Cre和flox是否连锁？
是否只需雄性小鼠？
是否必须同窝对照？
如何根据繁育目标推演制定合理的繁育计划？

繁育管理

Excel 表格（具体表格模板请参考附件文件）
专业管理系统

How to do the flox mouse breeding and genotyping-Biomodel,SH-Xiaohua Zhou.pdf(3855.96k)

How to do the flox mouse breeding and genotyping--Biomodel,SH-Xiaohua Zhou-Word.pdf(338.33k)

[基因名]小鼠繁育记录表-2015-00-00.xls(41.0k)

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2015-07-20 12:09 浏览 : 111543 回复 : 143

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genetics_ccm

常驻站友

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68楼

earth2010
想问一下各位老师，flox小鼠和KO小鼠的主要区别是什么？两者的主要用途呢？菜鸟咨询

KO小鼠就是全身基因敲除小鼠，在小鼠的每个细胞里该基因都是被敲掉的，而flox小鼠也叫CKO小鼠，是条件性基因敲除小鼠，在目的敲除片段的首尾各插入一段loxp序列，flox小鼠正常状态是无基因敲除的，但是当与能在特定器官组织细胞中表达cre酶的cre工具鼠交配，产生的双阳性后代的特定组织中因为有cre酶，而cre酶能识别loxp序列，从而把loxp序列之间的片段切掉，这样就实现了在特定组织器官细胞中的基因敲除。

2017-02-17 20:26