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【实验求助】NF-kB p65 总蛋白下降，磷酸化p65 不变，是否可说明NF-kB 未激活

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New小羊

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1楼

这个帖子发布于5年零277天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。

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条件有限，没有提胞浆蛋白和核蛋白，提的是总蛋白。结果是跟阴性对照组相比NF-kB p65 总蛋白下降明显，几乎快没有了，但磷酸化p65 不变，是否可说明NF-kB 未激活？

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2014-12-21 11:44 浏览 : 27448 回复 : 28

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dachong99

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2楼

kimico84
条件有限，没有提胞浆蛋白和核蛋白，提的是总蛋白。结果是跟阴性对照组相比NF-kB p65 总蛋白下降明显，几乎快没有了，但磷酸化p65 不变，是否可说明NF-kB 未激活？

NF kappa B的激活一般指p65磷酸化后从胞浆转运入核，调控相应基因的表达。
个人感觉，你现有数据有限，如果要投稿，reviewer可能会要求你提供：
1. 免疫荧光的检测，即p65是否入核，这是NF kappa B通路活性检测的常用指标，说服力较强；
2. luciferase 测p65转录活性指标；
3. WB法分别检测胞浆中、核内磷酸化p65的含量变化，一般要求高点的杂志会要求分别测这个
4. IHC等也行；
5. EMSA（电泳迁移技术）；
6. 其它。
1+3，基本可以支撑你的关于NF kappa B是否激活的argument了。
reviewer只关心你的问题是否说清楚，data是否support你的argument，楼主加油.

2014-12-21 12:01