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关于抗体电荷异构体之间是否存在相互转化问题？ [精华]

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楼主

cpu随风而逝

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+1 积分
1楼

这个帖子发布于5年零77天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。

如题，碰到的个问题，我用制备型HPLC分别分离收集酸碱性异构体，按照主峰峰谷收集，之后进行浓缩，去分析型检测，所用柱子介质一致，只是体积不同。如图所示结果虽然酸性异构体中酸性组分明显变多，但仍存在目的组分。目的组分纯度将近100，收集的碱性异构体更加神奇，酸性组分与碱性组分均增加。，目的组分的出现比较合理，收集碱性组分时，不应该还存在酸性组分。所以请教各位大神，是否有看到类似文献说酸碱性异构体之间会相互转换？
我个人知识，也许会有转换，比如C端赖氨酸存在显碱性峰，过程中被切除变成酸性异构体？只是原先结果显示该蛋白赖氨酸已经大部分被切除，，

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2014-04-02 14:18 浏览 : 42223 回复 : 62

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horizon801 编辑于 2015-08-28 20:02

• 上肢静脉评估——先理理头绪

楼主

cpu随风而逝

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丁香园准中级站友

4楼

thanks0576
无图无真相，楼主有图谱吗？感觉不太可能会转化的，你的实验具体是怎么设计的，分别收集三个峰再去IEC分析？

已经上图

2014-04-08 19:09

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• 一眼定乾坤（神内之急诊、卒中单元）

楼主

cpu随风而逝

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+1 积分
10楼

这个问题略久了，首先感谢各位战友的积极回答。对于这个课题，后续又做了一些研究。本人经过脱K之后发现，碱性峰比例相应减少（仍存在），而酸性第一个峰的比例明显上升，表明此酸性峰中确由碱性峰的一个成分脱K而来，另外碱性峰中并非只是一个翻译后修饰导致，而是一个混合物。对于是什么导致的翻译后修饰，样品正在送检打质谱，待日后再讨论。
ylhuang0502 说得现象以及文献我之前也有阅读过，因为我这里是纯化，用的制剂纯品，并不涉及培养液中的铜。
为了得到足够纯的样品，将第一次纯化的再重复分离，样品纯度上升不少，，但依然存在上述的现象。将碱性组分一直往后收集，收集完不浓缩，直接分析，仍能见到约有10%的主峰。这个现象也说明，酸碱性质相近，在这样的分离条件下，（HPLC,WCX-10柱子）不能完全分离。
综上，出现最开始的情况，两种因素都存在，分离效果不佳以及转化问题。

版主zhulikou431留言:
加分鼓励。

2014-12-01 09:10

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zhulikou431 编辑于 2014-12-13 16:09

• 还有人记得我吗？我想退学了

楼主

cpu随风而逝

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30楼

yww2012
请问，你是用的N2000软件吧？

并不是，，就用的agilent chemstation。

2015-08-10 12:24

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