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蛋白质和糖学

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论坛首页  >  蛋白质和糖学技术讨论版   >  蛋白质技术讨论
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【专题讨论】我在SDS-PAGE中所犯的错误 [精华]

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楼主 wuushark
wuushark
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这个帖子发布于17年零232天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
前些日子做SDSPAGE,做了两天,犯了一大堆错误,写出来供大家借鉴:
1。听有人说琼脂粉可以做封底胶,一试,漏了,还是用琼脂糖吧。
2 AP用别人旧的,结果胶不干
3 A液,B液用旧的,不干。
结论:不要用别人的,一定要自已配,别怕浪费。
4 前后Tris 的PH值搞错,结果不凝
5 电泳时长板接负极,反了
6 剥胶时,忘了切角,自已都不记得哪是哪的。
再剥时,分离胶与积层胶分开了,又搞不清什么是什么了。(可以用注射器向胶与玻璃之间注水,就可以很完整的剥下来。)
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2003-07-21 19:08 浏览 : 42610 回复 : 184
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biosepq 编辑于 2005-10-17 00:46
  • • (求大佬指点)医学专硕毕业,四证合一,在深圳找得到工作吗
meililv
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丁香园中级站友

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  • 2楼
我觉得防止记错加样顺序的方法可以是,MARKER两边加不同个数的样本。如:MARKER左边加了4个,右边加了5个。脱色完了,一看就明白了。
2003-07-21 19:25
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styang
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我是新来的,不过做实验做了几年了。可能楼上的老兄刚进实验室,世界上再牛的人刚开始都会范很多错误的。
2003-07-21 19:35
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小鱼儿1229
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我对跑PAGE也是深有体会,说出来与大家共享。
1.我们的AP一般分装后放在-20冰柜中,用时拿出融化,这样使用保存时间很长。
2.上样时一定同时在实验记录上记下你的上样顺序,因为如果你跑整块胶一定是不同的样,因此,脱色后可以根据记录大致判断出加样顺序。还有,上面的仁兄说得中间偏向空一个孔,两边加不同数量的样也可;再或者记住marker的位置,同样不会弄错左右面。
2003-07-22 10:10
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