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蛋白质和糖学

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【求助】请问免疫共沉淀（co-IP）中的input control是什么意思？

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楼主

常驻站友

1楼

这个帖子发布于7年零114天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。

文章修回，审稿意见说免疫共沉淀（co-IP）缺少input control，请教各位大侠，input control是什么意思？是加入的样品量的对照吗？是不是加个 β-actin对照就行了？
谢谢大家。

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2013-09-26 21:55 浏览 : 92379 回复 : 21

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• 「考研树洞」第一弹：大龄考研你怎么看？你身边有大龄考研的吗？

楼主

常驻站友

3楼

reyesa
在细胞裂完离心之后、加入抗体ip之前吸出来的细胞裂解液。可以在wb曝光时显示目的条带的位置以及比较不同泳道之间用于IP反应的细胞蛋白量。

十分感谢。您的意思是不是：用A蛋白做IP，拉拽下蛋白B，用wb检测到蛋白B；然后做IP前的总的细胞裂解液，直接做wb检测蛋白B的含量，从而比较下与A结合的B的含量？是这个意思吗？
把这两个图放一块就可以吗？还需要蛋白A的含量的对照吗？
期盼您的回答

2013-09-26 22:24

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• 文献求助

楼主

常驻站友

热

5楼

reyesa
我的意思是比如你有两组，一个对照一个给药，收了细胞以后裂解细胞做IP，你发现A和B的结合改变了。在得出这个结论之前你要保证两组的IP体系里加进去的蛋白总量是一致的，这个时候就需要input在wb图里证明你的两组里A的量是一致的，B的量也是一致的。input和IP一般是要求放在同一块胶上跑胶转膜的，最后一起压片的。
你压A的时候，input也会有A的条带出现。你压B的时候input泳道也会有B条带出现。

非常感谢。例如：我只是想证明P53和PHB之间是有相互结合的，最后的结果图这样的话，算是有input对照吗？这样可以吗？（这个图是从文献里找的）
IP：PHB

--------这是不是input对照？
IP：P53

本人比较笨，知识也匮乏，麻烦您了。

2013-09-26 22:56

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jomoo 编辑于 2013-09-26 23:07

• 世卫组织称新冠病毒变异速度比流感慢

楼主

常驻站友

7楼

reyesa
这个不算有input，只是有IP条带。严格的讲，这样不严谨。
以下面那个IP为例，我可以说你第二道里做IP的时候加的总蛋白量就多，所以IP下来的就多。或者我说你第二道的处理导致phb表达量增加了，所以p53 IP下来的phb就增多了。
这些假设都需要input来验证。

以下面的IP为例，如果不是分开的两个蛋白的条带，而是合并在同一块胶上的图话，就算是input了吗？
像是这样的结果可以吗？

我突然有点明白了，上面这个图也不是input，但是以上者两种图都是文献里的，是不是这样也可以啊，虽然不是很严谨。

2013-09-26 23:18

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jomoo 编辑于 2013-09-26 23:36

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