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蛋白质和糖学
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【专题讨论】原核表达条件优化！ [精华]
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潘福星
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丁当
335楼
各位大侠，我做原核表达，用的是p GEX-6P-1和BL21，我在加终止子的时候，是参考目的基因的标准序列参考的，用的是TCA，我做了几次诱导，但都没有出现目的条带，请教各位大侠，难道是终止子的事？
2013-01-04 19:42
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丁香调查第十九期：在您擅长治疗的疾病中，哪些医院的水平您最认可？
蜜兜
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丁当
336楼
好贴啊！
2013-03-01 16:22
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带CUFF血透导管隧道感染的超声表现
秦孝公赢渠梁
神经外科
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丁当
337楼
最近也在做原核表达，探索表达条件的优化，可总是做不出来，跑PAGE胶无特异性条带（空质粒做对照），而做WB显影却有条带（his标签，his抗体），请教prp怎么回事？
2013-03-09 00:44
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柳暗花明：经颈外静脉带CUFF透析导管置入
hawk_0917
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丁当
338楼
抱歉， 继续挖老帖子！
很多人提到IPTG的毒性问题，之前做表达的时候想过能否把IPTG分次给入，或者采用蠕动泵之类的东西慢慢给。感觉应该更有利于表达量的提高。还有就是表达时间的问题，几个小时之后不要忙着收菌，直接关灯睡觉，过夜第二天早晨回来接着干。反正包涵体性质稳定，过一夜应该不会出现很糟糕的情况吧！！
当然这些都是设想，并没有机会系统性的去做。扔出来就当砖头，没准有谁这样做过给解惑一下。
2013-03-11 17:08
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雾里看花、花非花----------“心梗”的坑
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