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蛋白质和糖学

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论坛首页  >  蛋白质和糖学技术讨论版   >  蛋白质技术讨论
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【专题讨论】原核表达条件优化! [精华]

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蜜兜
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    丁当
  • 336楼
好贴啊!
2013-03-01 16:22
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神经外科
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  • 337楼
最近也在做原核表达,探索表达条件的优化,可总是做不出来,跑PAGE胶无特异性条带(空质粒做对照),而做WB显影却有条带(his标签,his抗体),请教prp怎么回事?
2013-03-09 00:44
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hawk_0917
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铁杆站友

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  • 338楼
抱歉, 继续挖老帖子!
很多人提到IPTG的毒性问题,之前做表达的时候想过能否把IPTG分次给入,或者采用蠕动泵之类的东西慢慢给。感觉应该更有利于表达量的提高。还有就是表达时间的问题,几个小时之后不要忙着收菌,直接关灯睡觉,过夜第二天早晨回来接着干。反正包涵体性质稳定,过一夜应该不会出现很糟糕的情况吧!!
当然这些都是设想,并没有机会系统性的去做。扔出来就当砖头,没准有谁这样做过给解惑一下。
2013-03-11 17:08
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深渊的凝视
深渊的凝视
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    丁当
  • 339楼
楼主文章对我启发好大啊~~~
2013-04-01 20:58
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