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蛋白质和糖学

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论坛首页  >  蛋白质和糖学技术讨论版   >  Western Blot/IP
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【求助】western blotting如何从组织提蛋白,求详细步骤

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2015-12-19 00:15 来自 Android客户端
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组织块只有15-20mg,加裂解液只有200微升,用玻璃匀浆器之后裂解液根本倒不出来,各位前辈有没有什么更好的方法。
2015-12-20 11:56
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大部分公司的试剂盒上说的很清楚对冻存标本蛋白提取效果不好,但我们实验室都是用的冻存标本,也能提取出来,一定要用液氮研磨组织
2015-12-20 17:48 来自 Android客户端
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赤诚千年

组织块只有15-20mg,加裂解液只有200微升,用玻璃匀浆器之后裂解液根本倒不出来,各位前辈有没有什么更好的方法。




我做的组织更少,10mg都不到。我是把组织收集到500ul的ep管,然后加60-80ul左右的裂解液,然后超声把组织超碎。没有超声仪的话可以用玻璃研磨棒,淘宝上有买,是跟1.5mlep管匹配的。把组织从-80或液氮取出后要趁着组织还是硬的时候赶紧研磨,这样比较容易磨碎,然后再加裂解液。两种方法都是我摸索了好久才摸索出来的,挺好用的。

2016-01-25 23:09 来自 iPhone/iPad客户端
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