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【求助】水不溶的样品如何能做好反相C18纯化？

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楼主

入门站友

1楼

这个帖子发布于7年零317天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。

最近遇到一个问题和大家讨论下。手头正在做一个项目，样品（暂叫做A吧）在水中几乎一点不溶解，但是据一些渠道了解到，这个在纯化工艺中是有RPHPLC这一步的。等度C18分析柱上主峰保留时间约20min，杂质保留时间约23min。
1. 现在已知A在纯甲醇中溶解度能到400mg/ml，在50%甲醇中溶解度仅为4mg/ml。
2. A样在纯DMSO溶解度约为200mg/ml，在50%DMSO中溶解度能到100mg/ml，在25%DMSO中溶解度能到50mg/ml。
3. 在做C18柱纯化时，用20%乙腈-buffer平衡，37%乙腈-buffer等度洗脱约10个柱体积时主峰开始出峰。上样时已经尝试了样品用纯DMSO溶解、25%DMSO-水溶解，上样体积均为0.5ml（柱体积40ml），结果均感觉峰展宽严重，主峰后的杂质分不掉。
针对上述情况，大侠们有什么好的建议吗？碰到这种水不溶样品做反相纯化时大伙是怎么解决的呢？？？

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2013-03-12 16:55 浏览 : 1405 回复 : 1

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dandan521 编辑于 2013-03-13 20:27

• 医院试工害怕被「白嫖」怎么办？究竟去还是不去？

常驻站友

2楼

那在乙腈水中的溶解度好不好啊，要是好的话就换成乙腈水呗，然后用20%的乙腈试一试溶解度

2013-03-13 13:12

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• 注射新冠疫苗后的24小时…

楼主

入门站友

3楼

悠悠落叶
那在乙腈水中的溶解度好不好啊，要是好的话就换成乙腈水呗，然后用20%的乙腈试一试溶解度

乙腈中的溶解度还不如甲醇，好难弄啊

2013-03-13 15:37

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• 警惕！碎片化思维正在耽误 200 万年轻医生，弯道超车只需这 1 点

常驻站友

4楼

mycine
乙腈中的溶解度还不如甲醇，好难弄啊

调节酸碱度，加盐什么的也不好使么？是很疏水极性很小么？或者是进样量太大了峰太宽或者是进了柱子就不溶解了在柱子上沉淀出来了然后峰很宽，对了，在分析上是等度可以在制备上用梯度走，或者直接用甲醇水的流动相纯化，试一试

2013-03-13 15:40

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