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【求助】大肠杆菌表达外源蛋白诱导方式有哪些（升温or加IPTG）？现在工业上用哪种诱导方式比较多？为什么？

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楼主

madong5758

入门站友

1楼

这个帖子发布于7年零229天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。

大肠杆菌诱导表达外源蛋白一般都有哪些诱导方式，都用的什么质粒？特别是现如今工业上用那种诱导方式比较多，优势在哪里？那位老师给指点下，谢谢！！

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2012-06-04 17:57 浏览 : 4376 回复 : 4

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lh1988

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2楼

诱导方式一般都是用诱导剂吧，IPTG用的比较多，诱导时间短，蛋白表达也不错。质粒的话也有很多呀，根据不同的抗性基因，不同的酶切位点有很多种的。

2012-06-08 11:54

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huaizheng

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3楼

升温，IPTG，乳糖

2012-06-08 14:56

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xiyuki

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4楼

诱导方式大致由启动子决定，但也不排除人为加上某种阻遏物结合位点达到可控性表达的目的。e.coli中常用的启动子有不少，最终效果还是要看目的蛋白是什么，对特定蛋白来说，使用强启动子的表达效果未必最佳，所以很难说哪种表达方式有绝对优势。IPTG诱导的启动子有T7、tac、trc、lac；阿拉伯糖诱导的启动子有pBAD；温度调控的启动子有pL；色氨酸调控的启动子有trp；磷酸盐浓度调控的启动子有phoA；另外老外自己也会尝试组合成其他不常见的杂合启动子，除此之外，不需要诱导的组成型表达也没有被绝对排除采用。目前来说T7启动子具有最高的转录强度和调控严谨性，加上pET系列的载体商业化程度比较高，它在实验室中的使用率可能相对比较高，但是实际应用中综合各种因素考虑（如追求可溶性表达、分泌型表达），往往会选择相对较弱的启动子。

2012-06-11 21:44

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