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【求助】SDS-PAGE转印完缺条带!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!

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楼主

82916802

入门站友

1楼

这个帖子发布于9年零23天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。

问题已关闭悬赏丁当:2

郁闷，最近Western转印完，丽春红染NC膜后发现，某些泳道在80KD-130kD左右染色就是空白，看不到条带（一般10个泳道会有1、2个泳道这样），最后ECL显影那个地方就是没有条带！！！！或者，很淡很淡。。。。。如下图所示，第5个泳道缺了一块======================》
我们确定不是由于转印时气泡所引起的，而且以前没有出现过这样的情况。转印我们用的是湿转，120v 90min。以前没有任何问题！不知道现在怎么了。
想请教各位精英大侠们，帮忙看一看，知道的说一下哦，谢谢。

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2011-12-29 20:08 浏览 : 1890 回复 : 5

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82916802 编辑于 2011-12-30 09:07

• 俄患者体内出现 18 种变异新冠病毒？爆炸新闻还是翻译乌龙？

楼主

82916802

入门站友

3楼

vanee
重复过实验吗？重复的实验也是这样吗？建议你确认一下电泳的是否洁净，洗干净后烘干后使用，也可以将这个第五泳道的样品换个泳道来跑。

重复了好多次了，而且每次缺的泳道都不固定，缺的蛋白大小都是一样；
我们的玻璃板都是用超纯水冲洗过，而且等晾干后才组装的；
上的样品基本都是一样的。

2011-12-30 10:51

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• 首套【肺石医生】表情上架啦，一起斗图吧！

楼主

82916802

入门站友

5楼

cell100
如果你确定不是气泡的问题，可能是夹子松了！

我们有2套夹子，新的旧的，海绵也是2套，试过了还是有问题。。

2011-12-30 11:06

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楼主

82916802

入门站友

8楼

906003500
你可以在跑胶时，做2酚，一个用于转膜，然后立春红染色，还有一份用考马斯亮蓝染色，观察立春红未染上色的泳道，考马斯亮蓝是否也同样现象，如果是同样现象，可以确定是样品问题，如果不是，那么可能是转膜出现问题！

最近已经在试了，多谢。

2011-12-30 12:44

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