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水生生物学

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问：提取斑马鱼总RNA

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楼主

入门站友

1楼

这个帖子发布于9年零90天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。

最近，整个实验组都在提取斑马鱼的总RNA，跑电泳时可以出现三个条带，但A260/A280的比值总是在1.6-1.7之间徘徊，不知是哪里出了问题。操作过程要带手套和口罩
现在想问问大家，大家给出出主意，现将我所做的实验步骤写下来，大家给点意见吧，谢谢各位了
1 trizol（invitrogen）1ml裂解：收集7个不同时相的胚胎（每个时相20个，每个管中加入150?l裂解液，最后再并管）
2 12000rpm*5min 4℃离心，吸取上清液至一干净的Rnase free管中
3 加入200?l氯仿，剧烈震荡15S，室温放置3分钟，12000rpm*15min 4℃离心,
4 吸取上层水相至一干净的Rnase free管中，加入500?l异丙醇，室温放置10分钟，12000rpm*15min 4℃离心，弃上清
5 加入1ml75%酒精，7500rpm*5min 4℃离心，弃上清
6 晾干酒精，加入DEPC水10?l，55℃水浴10分钟，即完成提取RNA的过程

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2011-10-21 00:50 浏览 : 4004 回复 : 12

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• 一天上报八次体温，真正有体温计的人有几个？

楼主

入门站友

2楼

自己顶一下大家给点意见啊谢谢啦

2011-10-23 20:58

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• 你收到过哪些奇葩的会诊要求？欢迎分享你的会诊经验

丁香园中级站友

3楼

可能是有机溶剂没有去除干净。

2011-10-28 14:24

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• 今上午写报告遇到的，颅脑MR，您能看出几处异常？据说工作中很罕见！

楼主

入门站友

4楼

谢谢那需要怎么改进是乙醇没有挥发干净？

2011-10-29 21:16

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