更多

医药数据库

来问医生

登录注册

植物与农林科学

关注今日：0 | 主题：68931

论坛首页 > 植物学与农林科学讨论版 > 生命科学前沿

发帖
每发1个新帖
可以获得0.5个丁当奖励
回帖

【求助】使用戊二醛交联做western的蛋白样品的方法

只看楼主
页码直达：
直达末页

楼主

铁杆站友

1楼

这个帖子发布于9年零189天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。

看到有很多文献用戊二醛处理蛋白样品,然后跑SDS-PAGE再做blot，用特异性抗体标识同源二聚体或三聚体、四聚体的蛋白。我有几个问题想问，希望战友们帮我解疑：
1、如果我要做的蛋白同时存在四聚体和二聚体，可以同时标识出来两种多聚体的量么；
2、细胞或者组织用含有NP-40的蛋白裂解液提取的蛋白样品，能直接加入0.005%-0.1%的戊二醛进行交联么？我看有些方法说用PBS配制的戊二醛进行交联，难道是说细胞和组织蛋白不要用Lysis buffer提取，直接用PBS收集蛋白么？
3、如果已经加了SDS和巯基乙醇配制的loadingBuffer的蛋白样品，可以再加入戊二醛进行蛋白的交联么？我觉得SDS和巯基乙醇应该会破坏蛋白的二级结构，那么交联过后的蛋白样品是否改变Loading buffer的配制方法？
除了使用戊二醛，还有别的更好的方法进行同源二聚体量的检测么？
附件是使用其他试剂做交联的一个说明，比如DMS, DMA，但是没有具体的操作步骤，请大家多多帮助！

邀请讨论

搜索

2011-09-02 18:13 浏览 : 5496 回复 : 9

投票 2
收藏 5
打赏
引用
分享
- 微信扫一扫
- 新浪微博
- 丁香客
- 复制网址
举报
- 广告宣传推广
- 政治敏感、违法虚假信息
- 恶意灌水、重复发帖
- 违规侵权、站友争执
- 附件异常、链接失效
- 其他

• 又1例！40岁产妇住院安胎被吃引产药，此类事件为何频发？

入门站友

2楼

你好，请问戊二醛交联蛋白样品处理和跑胶的过程能不能告诉我一下谢谢啊

2014-03-12 15:26

投票
收藏
打赏
引用
分享
- 微信扫一扫
- 新浪微博
- 丁香客
- 复制网址
举报
- 广告宣传推广
- 政治敏感、违法虚假信息
- 恶意灌水、重复发帖
- 违规侵权、站友争执
- 附件异常、链接失效
- 其他

• 3 月首批公立医院招聘：应往届不限部分入编

入门站友

3楼

我也想用这个方法检测二聚体四聚体，请问楼主得到答案了吗？

2016-08-30 11:36

投票
收藏
打赏
引用
分享
- 微信扫一扫
- 新浪微博
- 丁香客
- 复制网址
举报
- 广告宣传推广
- 政治敏感、违法虚假信息
- 恶意灌水、重复发帖
- 违规侵权、站友争执
- 附件异常、链接失效
- 其他

• 2021协和初审成绩，学博

入门站友

4楼

jiangpozi
我也想用这个方法检测二聚体四聚体，请问楼主得到答案了吗？

这个方法的名称是什么啊，求助，一直想做多聚体的测定，不知道怎么做

2016-09-29 19:58

投票
收藏
打赏
引用
分享
- 微信扫一扫
- 新浪微博
- 丁香客
- 复制网址
举报
- 广告宣传推广
- 政治敏感、违法虚假信息
- 恶意灌水、重复发帖
- 违规侵权、站友争执
- 附件异常、链接失效
- 其他

• 3 月首批公立医院招聘：应往届不限部分入编