【交流】熟悉冰冻切片机的请进,刻度选择:一个困扰已久的问题,今天终于发问了?

wanliheng

丁香园版主

冰冻切片机是形态学常用的工具之一。

有许多的使用技巧,战友们都讨论了很多,

比如:llusion战友的精华帖 冰冻切片的使用技巧:http://morph.dxy.cn/bbs/topic/15782788?tpg=1&age=-1

附件1:是一份leica CM1850的英文说明书,里面有常用部件的名称,切不同组织时所需温度,以及常见问题产生的原因和解决办法,大家可以借鉴很多的。

附件2是 两个 专门讨论冰冻切片的paper:

帖子中的图片是我们实验室的Leica CM1850的一个局部,图片2和3是1的放大,用过切片机的都比较熟悉了。而我要向大家请教的问题也就在这张图中。

我的问题是

(1) 图片2中的刻度a 和 刻度b 应该是一个怎样的对应关系?印象中leica售后说过刻度线a 一般是和刻度线b的5对应的,但是也没说为什么。不知各位战友实验室的冰冻切片机的这个部位是如何选择的,希望能提供经验。如果没有在意过这个问题,还请费心看一下切片机的这个部位是如何选择刻度的,也好供大家参考!

(2)图片3好像也是可以调节的,不知道有没有战友注意过这个问题,该如何调节?

谢谢大家了,我的最主要的问题是第一个,希望大家提供经验,盼复!


CM1850_en.pdf(1443.48k) 在线查看

lieca cm1850.rar(5095.63k) 在线查看
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wanliheng edited on 2011-08-13 17:13 举报
sszx

丁香园版主

也经常且 但楼主的问题 没仔细研究过 所有这两者 的目的 都是 调整你能切刀比较好的片子 而如何调 应该要基于你的组织块是如何包埋的 然后进行位置调整
图片2主要调整横向的? 如选择好玻璃片的最佳位置
图片3主要调整 包买块的 倾斜度 以达到 组织最佳位置
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wanliheng

丁香园版主

sszx wrote:
也经常且 但楼主的问题 没仔细研究过 所有这两者 的目的 都是 调整你能切刀比较好的片子 而如何调 应该要基于你的组织块是如何包埋的 然后进行位置调整
图片2主要调整横向的? 如选择好玻璃片的最佳位置
图片3主要调整 包买块的 倾斜度 以达到 组织最佳位置


对啊,咋调啊?

图2 在我看来是调切片刀的角度的,图3是调组织块得角度的,可问题的关键是咋调啊?

怎么样才算调整好了呢?我在leica的切片机说明书上找不到相关的信息!
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sszx

丁香园版主

具体调整 如下图所示 C D 黑色塑料螺钮
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march1108
我也提提自己的想法,借用sszx的图,如图4:C区的螺旋是调节刀架或者刀座逆时针旋转,从而调节刀座角度,当a刻度与b刻度的数字重合时,表示当前角度,图4中角度太小,这样不太适合切某些组织的冰冻。徕卡一般5°到10°都可成片,本人觉得5°就够了,我们也是用的5°

D区的螺旋作用是松开刀架,使刀片置入

有些组织,如小鼠的脊髓,脑组织,组织脆,容易空洞皱褶,这时就要适当调节角度,具体要靠经验...有些质硬组织如乳腺,宫颈,特别是带脂肪的乳腺,角度就要调节大一点,有助成片。

冰冻这块,科研和外检都做得蛮多的,大家多多交流,盼跟帖
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march1108
march1108
march1108
c旋,从楼主的说明书看,应该是调节切片的厚度,最多60个微米

b旋的扭动可以固定和松动机头的组织a旋很少用但是作用很大,特别是当你切小组织与薄组织时,可使机头左右或者上下旋动,这样可以切出最大组织面如图5
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shanglei1986
我一般都是把那个角度调的比较小 我是切视网膜组织的
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柴晓燕
zhenglb1982

医师认证泌尿外科

我也切过很多,自己瞎跳,过一段时间摸索就掌握了。实践出真知啊
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wanliheng

丁香园版主

zhenglb1982 wrote:
我也切过很多,自己瞎跳,过一段时间摸索就掌握了。实践出真知啊
能分享经验吗?调节到哪一种程度算好呢?谢谢
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zhenglb1982

医师认证泌尿外科

介个... 很难表述的
务必实践才行
根据组织的不同,要摸索适当的操作温度,太高了会很黏,太低了又容易脆,容易裂。
切的角度要掌握好,切的厚度是越小越好,但如果条件不成熟就是切不薄。
组织块不能太大。
理想境界是这样的:切出来的组织完整的一小片,小片中间是组织,外周是冻上的OCT,很漂亮、很薄,没有“顿挫”,平整,色泽一致。有时候可以连续切。然后,转到准备载玻片上。
诶,做好了很享受的
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wanliheng

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zhenglb1982 wrote:
介个... 很难表述的
务必实践才行
根据组织的不同,要摸索适当的操作温度,太高了会很黏,太低了又容易脆,容易裂。
切的角度要掌握好,切的厚度是越小越好,但如果条件不成熟就是切不薄。
组织块不能太大。
理想境界是这样的:切出来的组织完整的一小片,小片中间是组织,外周是冻上的OCT,很漂亮、很薄,没有“顿挫”,平整,色泽一致。有时候可以连续切。然后,转到准备载玻片上。
诶,做好了很享受的
我主要想问切片刀和组织的角度如何调节。如图,假如切片机被调乱了,那么要想切成a切面 或者是B切面,该怎么样调节呢?
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wanliheng edited on 2011-08-28 18:53 举报
manbu高中生
stcho
如果想熟悉冰冻切片机的使用,最好之前先熟悉一下石蜡切片机的使用。这两者的使用方法是触类旁通的。我在的这个实验室条件有限。我们使用的冰冻切片机是由两部分组成的:石蜡切片机+一套水冷的制冷装置。水冷装置有两个半导体,一个靠磁性吸附到钢刀上或者一次性刀架上;另一个夹到探头上。我另附了张图,不知有用过这种机器的人没?
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wanliheng

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stcho wrote:
如果想熟悉冰冻切片机的使用,最好之前先熟悉一下石蜡切片机的使用。这两者的使用方法是触类旁通的。我在的这个实验室条件有限。我们使用的冰冻切片机是由两部分组成的:石蜡切片机+一套水冷的制冷装置。水冷装置有两个半导体,一个靠磁性吸附到钢刀上或者一次性刀架上;另一个夹到探头上。我另附了张图,不知有用过这种机器的人没?


头一次见
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stcho
切的片子效果和北京协和医院病理科切出来的片子效果没有差别;这个切片机很好用,简便易行。就是不知道寿命能延续几年,切片机里面的传动装置和齿轮不知道能不能用得住,毕竟是国产的。这个切片机的步进齿轮在前面;一般的石蜡切片机的步进都在机器的左侧;但这并不妨碍使用。我刚参加工作的时候天天喝石蜡切片机打交道,天天就跟切羊肉片似的。这东西长时间不用手不会生疏;生疏的只是对各种组织的切片掌握情况会有所淡忘,如切片厚度、切片的难易程度、心脑脾肺肾哪个容易切碎、钢刀和组织之间的仰角、蜡块组织自身的仰角等。量的积累没有达到一定的程度,就不能升华;还需要进一步的积累!
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