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植物与农林科学

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论坛首页  >  植物学与农林科学讨论版   >  生命科学前沿
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【专题讨论】酵母双杂交

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donggua
排除过假阳性的可能了么?门外汉一个,呵呵,帮你呼叫下酵母杂交的专家 @bangzejin 和 co-ip 专家 @jacqueslm2001
Thank you!@donggua
2013-07-12 10:36
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bangzejin老师果然是YTH方面的大神啊,给力!关注!
2013-07-30 21:09
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楼主 bangzejin
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你好,我现在也做酵母双杂交,我有个疑问,我做的是病毒的衣壳蛋白,无囊膜,由于其特殊性,酵母里面表达的蛋白和病毒本身组装后的衣壳蛋白结构会有不同,那么用这个蛋白来筛库,结果可靠性有多高,后期做验证又需要注意些什么呢?十分感谢!@bangzejin

酵母是低等真核生物,与高等真核生物和病毒虽然在蛋白翻译后加工修饰方面有一些差异,但是酵母双杂交系统的目的是寻找相互作用蛋白,找到潜在互做蛋白后,用于后期验证。酵母双杂交系统随实验平台、实验人员的操作经验筛到的互做蛋白会有些差异,可能漏筛或筛到更多的假阳性克隆。如果你的是病毒蛋白的话,后期验证回到病毒的体系中去话,会更有说服力。
2013-08-29 10:26
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康静敏k
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bangzejin您好,我建了一个真菌的cDNA文库,在做Library Titering时超出了说明书上给出的范围,我把收集好的菌液稀释了一百万倍,板上还有280个克隆。请问这是怎么回事?我在收集克隆时就发现一个板上的克隆长的多,但不是杂菌。
2013-09-21 09:59
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