12...56
 

【原创】细胞培养减少污染的小细节（求票）

holywater
holywater
加关注
2010-07-11 09:19 消息 引用 收藏 分享 只看楼主
很多实验者都不bother自己洗手，酒精一喷就去实验了。我告诉大家，这极端错误
个人经验是，你仔细洗手比喷酒精效果还好。最好的是肥皂/香皂仔仔细细的洗手，一直到手腕，指甲缝都要洗。洗两遍是一个不错的选择。然后手上喷酒精，
有人穿半截袖的白大褂去做实验，每次我看到都想骂。白大褂袖口要长，最好是袖口扎紧的那种，如果不能的话，把袖口窝向手臂。裸露的手腕部分一定也要喷酒精。戴上手套后手请避免接触工作台外面，如果不得已接触，那再喷酒精。宁可手套酒精味多一些。
拿培养瓶和培养液时候请托下面拿，切忌不要拿瓶颈部位。
每天实验开始时候，超净台/实验间 照20分钟紫外是不错的选择
有一点要注意的是，超净台里面的东西一定要尽量少放。放的越多越容易污染
尽量避免操作时候说话，尤其是严禁细胞房打闹说笑。
每天观察细胞状态，不要总想着save，而是发现细胞不对劲（比如生长缓慢）就立即扔掉。有些（比如支原体）污染，镜检是看不到的，但是细胞的生长异常。所以如果细胞生长异常，那么请扔掉，同时由于支原体空气传播，请检查自己的培养液和培养箱是不是污染。

注意：很多人有个误区，认为进口血清都是贵，其实不然。GIBCO的 NCS，马血清，都比国产的便宜的多，质量好的多。只有FBS才很贵，
很多时候国产血清往往是污染源，所以用国产血清要严格监控状态。
36票

票数

holywater edited on 2010-07-11 12:32 举报
holywater
holywater
加关注
2010-07-11 12:32 消息 引用 收藏 分享
自顶一下，有些时候细节决定成败
0票

票数

举报
19717190
19717190
加关注
2010-07-12 10:46 消息 引用 收藏 分享
谢谢楼主 很多细节是要多注意 我才养细胞
0票

票数

举报
franklinding1981
franklinding1981
加关注
2010-07-12 13:40 消息 引用 收藏 分享
非常实在，谢谢分享。
0票

票数

举报
孙悟色
孙悟色
加关注
2010-07-27 20:27 消息 引用 收藏 分享
值得学习！
0票

票数

举报
秋千格
秋千格
加关注
2010-07-27 23:10 消息 引用 收藏 分享
谢谢提醒~
0票

票数

举报
ying930035
ying930035

医师认证小儿眼科

加关注
2010-07-29 00:48 消息 引用 收藏 分享
多谢楼主，回想自己平时确实对这些不怎么注意，以后改正！
0票

票数

举报
沁香
沁香
加关注
2010-07-29 12:02 消息 引用 收藏 分享
刚开始养细胞，有很多细节都不知道，多谢楼主
0票

票数

举报
laorentou
laorentou
加关注
2010-07-29 17:09 消息 引用 收藏 分享
多谢细心的楼主啊……
可以改掉好多自己不好的习惯。
0票

票数

举报
yjq_2004
yjq_2004
加关注
2010-07-30 16:08 消息 引用 收藏 分享
谢谢楼主分享经验！
0票

票数

举报
棋子45517945
棋子45517945
加关注
2010-08-03 10:26 消息 引用 收藏 分享
受教，多谢。
0票

票数

举报
huangbaoyu0828
huangbaoyu0828
加关注
2010-08-04 10:21 消息 引用 收藏 分享
谢谢楼主分享！！！
0票

票数

举报
michealwyd
michealwyd
加关注
2010-08-10 14:41 消息 引用 收藏 分享
谢谢，刚开始养细胞。
0票

票数

举报
michealwyd
michealwyd
加关注
2010-08-10 14:42 消息 引用 收藏 分享
谢谢，刚开始养细胞。
0票

票数

举报
zhangyun110
zhangyun110
加关注
2010-08-16 17:11 消息 引用 收藏 分享
xiexie
0票

票数

举报
entmao
entmao
加关注
2010-08-17 21:21 消息 引用 收藏 分享
很多都是我们容易犯的，受教了，谢谢。
0票

票数

举报
wfrainbow
wfrainbow
加关注
2010-08-22 19:42 消息 引用 收藏 分享
受教了
0票

票数

举报
ammszdy
ammszdy
加关注
2010-08-23 14:46 消息 引用 收藏 分享
做实验应该戴一次性手套吧，怎么会洗手什么之类的，不明白？
0票

票数

举报
zhoushaolai99
zhoushaolai99
加关注
2010-08-23 16:47 消息 引用 收藏 分享
真的很奇怪，楼主做细胞试验不戴一次性的无菌手套吗？
0票

票数

举报
第一号
第一号
加关注
2010-08-23 19:11 消息 引用 收藏 分享
谢谢 楼主分享了!

但夏天做实验时，有事不得以 要穿短袖白大褂的？
0票

票数

举报
火车二场
火车二场
加关注
2010-08-23 22:37 消息 引用 收藏 分享
holywater wrote:
很多实验者都不bother自己洗手，酒精一喷就去实验了。我告诉大家，这极端错误
个人经验是，你仔细洗手比喷酒精效果还好。最好的是肥皂/香皂仔仔细细的洗手，一直到手腕，指甲缝都要洗。洗两遍是一个不错的选择。然后手上喷酒精，
有人穿半截袖的白大褂去做实验，每次我看到都想骂。白大褂袖口要长，最好是袖口扎紧的那种，如果不能的话，把袖口窝向手臂。裸露的手腕部分一定也要喷酒精。戴上手套后手请避免接触工作台外面，如果不得已接触，那再喷酒精。宁可手套酒精味多一些。
拿培养瓶和培养液时候请托下面拿，切忌不要拿瓶颈部位。
每天实验开始时候，超净台/实验间 照20分钟紫外是不错的选择
有一点要注意的是，超净台里面的东西一定要尽量少放。放的越多越容易污染
尽量避免操作时候说话，尤其是严禁细胞房打闹说笑。
每天观察细胞状态，不要总想着save，而是发现细胞不对劲（比如生长缓慢）就立即扔掉。有些（比如支原体）污染，镜检是看不到的，但是细胞的生长异常。所以如果细胞生长异常，那么请扔掉，同时由于支原体空气传播，请检查自己的培养液和培养箱是不是污染。

注意：很多人有个误区，认为进口血清都是贵，其实不然。GIBCO的 NCS，马血清，都比国产的便宜的多，质量好的多。只有FBS才很贵，
很多时候国产血清往往是污染源，所以用国产血清要严格监控状态。


忍不住还是要argue一下，虽然说得的确很有道理。
1，反复的洗手加喷酒精，为什么不带乳胶手套？夏天还好，冬天如何？男生皮糙肉厚还好，女生细皮嫩肉如何？不要说乳胶手套贵，比起反复的仍细胞便宜得多。
2，白大褂真的有那么干净吗？我一般都不穿白大褂，尤其夏天，热是其一，没必要是其二，穿白大褂那是为了防护自己。
3，超净台照紫外是步骤一，吹20分钟是步骤二，步骤二的重要性远大于步骤一。
4，说话对细胞培养是没有任何影响的，只要不影响到你的操作。大家一起边做细胞，边聊天，其乐无穷。
5，我倒认为save是做细胞的一条基本原则。至于细胞生长异常要具体问题具体分析，有些细胞你是仍不起的。

呵呵， 尖锐些，别介意。
实验小心一些是好，但不要因而缩手缩脚，会吓走一批人。Tongue
3票

票数

举报
xiaofeiyu_丁1
xiaofeiyu_丁1
加关注
2010-08-23 22:58 消息 引用 收藏 分享
希望大家多分享些经验就更好了。
0票

票数

举报
doc_zxj
doc_zxj
加关注
2010-08-23 23:24 消息 引用 收藏 分享
我是一个可悲的细胞培养者，细胞把我折磨到疯了，虽然不污染，但是就是长得不好

PS：我只说一点吧，不要直接酒精喷手就操作，戴手套绝对是最佳选择。
0票

票数

举报
春天的末班地铁
春天的末班地铁
加关注
2010-08-24 08:47 消息 引用 收藏 分享
不是很同意楼主的意见。我养细胞从没污染过，从肿瘤细胞到间充质干细胞到神经细胞，一直很成功。现把我的程序说说，希望给学弟学妹一点经验：
1、注意实验室卫生，每周消毒液拖地板一次，擦所有工作台面一次。
2、实验前，实验室、生物安全柜紫外消毒。
3、进入实验室，穿隔离服，戴口罩帽子，戴手术手套。
4、实验中，注意各种细节，不能污染。
4、实验前后，细胞培养瓶一定要烧瓶口。

最后，个人经验：细胞长得慢的，可提高血清浓度；细胞老化快的，可减少血清浓度。
2票

票数

举报
wjused
wjused
加关注
2010-08-24 10:43 消息 引用 收藏 分享
有用，收藏
0票

票数

举报
wjused
wjused
加关注
2010-08-24 10:43 消息 引用 收藏 分享
有用，收藏
0票

票数

举报
wjused
wjused
加关注
2010-08-24 10:43 消息 引用 收藏 分享
有用，收藏
0票

票数

举报
fly1032
fly1032
加关注
2010-08-24 15:50 消息 引用 收藏 分享
谢谢分享
0票

票数

举报
hongyestn
hongyestn
加关注
2010-08-24 16:07 消息 引用 收藏 分享
细胞污染我遇到过，大半年没污染的事也遇过，感觉不穿白大褂不是污染的原因，洗手、不戴手套也不是
0票

票数

举报
cwwlh
cwwlh
加关注
2010-08-25 12:38 消息 引用 收藏 分享
大家可能都听过这样说法，很多国外的实验室，养细胞的人很随便，不用穿白大衣，也不用酒精灯，我没有这样的经历，但是我一个刚刚回国的朋友就是这样做的，细胞几乎没污染过，我们讨论了一下原因，最主要的就是空气质量的问题，我们的环境差，污染的几率就会大增。所以平时的时候，我们实验室就是每周都要用过氧乙酸全面清洁，一旦多个人的细胞出现污染的情况，就必须全面清理消毒培养箱，不要把细胞扔了就算了。还有，我硕士养了2年细胞博士养了3年细胞，从来没有带过手套（除非手受伤了），我们的水池就在细胞间门口，洗完手直接进去，实验室的同学都是这么做的，细胞都长得很好。手套也是污染源之一，我们国内大多数实验室没有经济实力购买外科手术用的几块钱1付的手套，很多几毛钱1付的手套都不是无菌的，有的实验室更是节省，1副手套用坏为止，这样反倒增加了污染机会。
0票

票数

举报
dor22
dor22
加关注
2010-08-25 13:41 消息 引用 收藏 分享
谢谢楼主的分享
0票

票数

举报
shuhui446
shuhui446
加关注
2010-08-25 13:45 消息 引用 收藏 分享
LZ的有些话还是比较有道理的。
最主要的就是该注意的地方一定要注意到才行。
细胞间里不至于到不能说话的地步，但是嬉笑打闹应该是禁止的。
本来实验室就是工作的地方，还是要严肃一些。
0票

票数

举报
niaoer
niaoer
加关注
2010-08-25 14:25 消息 引用 收藏 分享
谢谢各位的经验，我最近也开始养细胞，污染了几次，跟师兄师姐们学习经验，发现还是有很多细节是自己没有注意到的。另外带着手套喷酒精进超净台手被烧了好几次，弄得自己现在缩手缩脚老怕污染。就其原因还是觉得自己在操作时的无菌意识不够强，在超净台东西乱放不说 ，还在养细胞的培养皿上晃来晃去， 不污染都是奇迹啊！希望自己的教训能让大家的细胞养的更好！
0票

票数

举报
wujuan86
wujuan86
加关注
2010-08-25 16:37 消息 引用 收藏 分享
学习学习!
0票

票数

举报
wuwxy
wuwxy
加关注
2010-08-25 22:15 消息 引用 收藏 分享
实验中是有很多不容易注意到的细节！
0票

票数

举报
12...56