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【求助】bv-2细胞的培养！

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楼主

常驻站友

1楼

这个帖子发布于10年零39天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。

最近一个多月一直在摸索bv-2细胞的培养方案，可是老养不好，昨天又复苏了一管，今天看贴壁的也不好，估计凶多吉少。
我的方案如下：（希望高手们多多提意见，帮忙分析一下）
1.培养基是：DMEM（高糖）+10%FBS+1%双抗
2.因为BV-2是半贴壁半悬浮细胞，所以贴壁的细胞占到80-90%就传代，传代时使用胰酶。消化时间1分30秒（常温），总得感觉消化速度很快。
悬浮的细胞收集，和贴壁细胞混合后离心分瓶。
3.传代比例是1:3。2天换液传代。

刚开始细胞长得很快，感觉一天左右就贴满了。还有很多一串一串悬浮着。可是传了三到四代以后，就发觉细胞不行了，贴壁的少，悬浮着多，形态也不好，碎片越来越多，感觉培养基里面小颗粒样的东西很多，换液后一天左右，就感觉培养基有很多杂质，不干净。细胞不生长，最后就挂了。
昨天复苏的一管，复苏完后在显微镜下观察，细胞圆形的都悬着，感觉状态还行？可是今天去看，贴壁的很少，悬着的不是抱团，就是呈小黑点（一个一个的。感觉没有胞质）。培养基颜色也很红。记得上次复苏一天后培养基就变的有点深黄色了。现在感觉细胞根本不生长。

***高手帮忙啊！再养不好，死的心都有了！:(

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2010-06-28 22:01 浏览 : 9959 回复 : 20

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• 不是每一个中年男性的「啤酒肚」，都是发福…

丁香园准中级站友

2楼

这个细胞我也养过的，感觉不是半贴壁的。是完全贴壁的，跟正常贴壁细胞一样养，长的速度非常快。几乎要天天传代。

细胞刚来的时候是我接手的，没有见过有悬浮的细胞。养着也没有见过悬浮的细胞。

2010-06-29 10:36

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• 2020年浙江省骨科副高考试题目回忆

楼主

常驻站友

3楼

barin
这个细胞我也养过的，感觉不是半贴壁的。是完全贴壁的，跟正常贴壁细胞一样养，长的速度非常快。几乎要天天传代。

细胞刚来的时候是我接手的，没有见过有悬浮的细胞。养着也没有见过悬浮的细胞。

感谢barin的解答。
我的细胞是中科院肿瘤研究所买来的。我咨询了那边的老师，他们说是半贴壁半悬浮细胞。养的条件要自己摸索。
你能不能把你养bv2的方案或注意事项发给我？我的邮箱zq82923@tom.com
谢谢:)

2010-06-29 17:25

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• 2020-8-2普外科副高回忆贴(请求加精)

丁香园准中级站友

4楼

可能应该是半贴壁半悬浮的细胞，只是我自己的感觉这个细胞是贴壁的。
就像SP2/0，有人说是半悬浮的。但是我养的时候，也是按照贴壁细胞去处理的。

2010-06-29 18:12

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