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蛋白质和糖学

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论坛首页  >  蛋白质和糖学技术讨论版   >  Western Blot/IP
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【原创】做磷酸化蛋白的Western blotting之我见---与同仁交流 [精华]

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可以使用无蛋白封闭液,脱脂奶不可以用
2013-08-20 21:33
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好帖子,占位慢慢看。TLR4做的及其郁闷。。
2013-10-01 23:55
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llllcjchina
可能是你的目的蛋白量较少造成的。最好是用提核蛋白的提取液,以更好地浓缩蛋白。
我要做的跟上面的类似,细胞加药刺激后,需要提取细胞核蛋白,再比较磷酸化和非磷酸化蛋白的变化。细胞在什么时候出现磷酸化,是一个固定的时间还是需要自己根据实验摸索磷酸化的时间梯度?
用的是pierce的核蛋白提取试剂盒,同时能提取浆蛋白,我只需要观察核蛋白的变化情况,是不是浆蛋白就不用留了?
2013-10-06 15:57
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舒睿817
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freekeety
我要做的跟上面的类似,细胞加药刺激后,需要提取细胞核蛋白,再比较磷酸化和非磷酸化蛋白的变化。细胞在什么时候出现磷酸化,是一个固定的时间还是需要自己根据实验摸索磷酸化的时间梯度?
用的是pierce的核蛋白提取试剂盒,同时能提取浆蛋白,我只需要观察核蛋白的变化情况,是不是浆蛋白就不用留了?

新手,同时求教。
2013-10-14 21:58
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