发帖
每发1个新帖
可以获得0.5个丁当奖励
回帖

【求助】救命啊！HepG2 细胞成团如何解决

只看楼主
页码直达：
直达末页

楼主

蛋白表达

全科

入门站友

1楼

这个帖子发布于11年零125天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。

请教各位高手:我刚刚开始养HepG2细胞，在DMEM+10%FBS的条件下培养，可细胞都成团贴壁生长了，我传代时用胰酶消化也是一团一团的，没有多少单细胞，我也不敢消化太狠怕过头，可成团生长好像细胞状态越来越差，请教各位大侠，有没有碰到类似情况，如何解决的，如何才能让HepG2单层生长。谢谢！

邀请讨论

搜索

2009-09-18 13:47 浏览 : 4262 回复 : 19

投票
收藏 6
打赏
引用
分享
- 微信扫一扫
- 新浪微博
- 丁香客
- 复制网址
举报
- 广告宣传推广
- 政治敏感、违法虚假信息
- 恶意灌水、重复发帖
- 违规侵权、站友争执
- 附件异常、链接失效
- 其他

• 胸闷伴出汗1小时，帮忙诊断一下心电图

xiongran

常驻站友

+1 积分
2楼

不知道你的胰酶有没有加EDTA，其实对于一些细胞系，EDTA的作用还是很重要的，特别是有些细胞仅仅用胰酶消化时，细胞会呈片状掉下，但是细胞并没有分成单个，而是成团，即使反复吹打也不一定奏效，反而损伤细胞，加了EDTA对于分散细胞的作用还是很大的，如果你的胰酶加了EDTA还是这样，建议你先消化，待细胞变圆间隙变大的时候弃消化液，让残留的胰酶继续消化一段时间，这样也不容易消化过头，然后用手轻拍培养瓶，将细胞拍下，加新鲜培养基吹打分散细胞，分瓶培养。其实只要不是很大的团影响不是很大，想把细胞完全消化成单个单个的不太现实也没有那个必要。总之你自己把握这个尺度吧。

2009-09-18 15:58

投票
收藏 1
打赏
引用
分享
- 微信扫一扫
- 新浪微博
- 丁香客
- 复制网址
举报
- 广告宣传推广
- 政治敏感、违法虚假信息
- 恶意灌水、重复发帖
- 违规侵权、站友争执
- 附件异常、链接失效
- 其他

• （原创）重症高渗高血糖综合征的急诊急救？

楼主

蛋白表达

全科

入门站友

3楼

谢谢xiongran的帮助! 我的胰酶有加EDTA的,但我的细胞基本上都是一团一团的,没有太分散的细胞,所以不太可以看的到细胞间隙的变化,都是一团一团的掉下来,我刚刚在传的时候也增加了消化时间.可好象效果不是很明显,细胞一团一团的感觉包在里面的细胞都要死掉了,都要急死我了,这个十一看来只能和这个细胞较劲了,希望有经验的各位大侠能象xiongran一样帮帮忙啊!谢谢了!

2009-09-18 17:29

投票
收藏
打赏
引用
分享
- 微信扫一扫
- 新浪微博
- 丁香客
- 复制网址
举报
- 广告宣传推广
- 政治敏感、违法虚假信息
- 恶意灌水、重复发帖
- 违规侵权、站友争执
- 附件异常、链接失效
- 其他

• 被曝欠外债20亿、欠薪1年多，全院医护第2次游行讨薪！

neuron06

入门站友

4楼

需要摸一下EDTA浓度1-2mM，另外用烧过的巴氏管轻轻吹打比较有效。

2009-09-18 21:32

投票
收藏
打赏
引用
分享
- 微信扫一扫
- 新浪微博
- 丁香客
- 复制网址
举报
- 广告宣传推广
- 政治敏感、违法虚假信息
- 恶意灌水、重复发帖
- 违规侵权、站友争执
- 附件异常、链接失效
- 其他

• 胸闷伴出汗1小时，帮忙诊断一下心电图

细胞技术

【求助】救命啊！HepG2 细胞成团如何解决

提示

丁香园旗下网站

关于丁香园

官方链接

细胞技术

分享到：

微信扫一扫

【求助】救命啊！HepG2 细胞成团如何解决

微信扫一扫

微信扫一扫

微信扫一扫

微信扫一扫

提示

丁香园旗下网站

关于丁香园

官方链接