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【讨论】分离柱的选择和洗脱系统的选择及其选择的依据

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楼主 enyagao
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这个帖子发布于12年零243天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
大家好!我是新手,在做实验方面大概思路有,但遇到具体的就不知所措。我们主要是做中药的成分分离,提取——萃取——分离——结构测定,我们都知道在做分离时,大都是通过柱层析来分离,请问选择什么样类型的柱子(如硅胶柱,凝胶柱等),及洗柱子的流动相的系统选择的依据?
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2008-07-08 22:49 浏览 : 8058 回复 : 17
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我是做药物化学合成方向的,我们实验室 用过正相硅胶柱层析,反相硅胶C18柱层析,活性炭柱层析这三种。
我先说一下正相硅胶柱,这种柱子是极性小的先被洗脱下来,然后才是极性大的物质下来,洗脱剂一般有石油醚、乙酸乙酯、正己烷、氯仿等几种,正相硅胶柱的洗脱剂选择一般是根据TLC来判断的,先用TLC来跑你的物质,找到合适的的展开剂,然后将TLC展开剂极性减半就可以作为正相硅胶柱的洗脱剂了,洗脱的时候可以选择梯度洗脱也可以选择均梯度洗脱。
反相硅胶C18柱子,是极性大的物质先出来,然后是极性小的在出来,洗脱剂一般是水、乙腈、甲醇等,反相C18柱层析洗脱剂的选择我们是根据HPLC来定的,一般自己装的反相C18柱硅胶颗粒比HPLC的柱子填料大很多,为了得到好的分离效果,需要将HPLC的流动相的极性增大10%就可以了。如果条件允许用反相板也可以确定洗脱剂。
活性炭柱层析用的是颗粒状活性炭,一般是极性大的先出来,然后是极性小的。洗脱剂是甲醇、乙醇、水等,一般是先用水冲柱子,然后逐渐增加醇的比例洗脱就可以了。
2008-07-09 08:32
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至于凝胶柱层析我们没有用过,你可以在园子里搜索一下,这方面的资源也很多。
2008-07-09 08:34
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楼主 enyagao
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  • 4楼
谢谢,看了你写的东西,让我知道了不少!谢谢你的指导!
2008-07-13 22:53
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