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【讨论】分离柱的选择和洗脱系统的选择及其选择的依据

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楼主

入门站友

1楼

这个帖子发布于12年零243天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。

大家好！我是新手，在做实验方面大概思路有，但遇到具体的就不知所措。我们主要是做中药的成分分离，提取——萃取——分离——结构测定，我们都知道在做分离时，大都是通过柱层析来分离，请问选择什么样类型的柱子（如硅胶柱，凝胶柱等），及洗柱子的流动相的系统选择的依据？

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2008-07-08 22:49 浏览 : 8058 回复 : 17

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cw0926

铁杆站友

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2楼

我是做药物化学合成方向的，我们实验室用过正相硅胶柱层析，反相硅胶C18柱层析，活性炭柱层析这三种。
我先说一下正相硅胶柱，这种柱子是极性小的先被洗脱下来，然后才是极性大的物质下来，洗脱剂一般有石油醚、乙酸乙酯、正己烷、氯仿等几种，正相硅胶柱的洗脱剂选择一般是根据TLC来判断的，先用TLC来跑你的物质，找到合适的的展开剂，然后将TLC展开剂极性减半就可以作为正相硅胶柱的洗脱剂了，洗脱的时候可以选择梯度洗脱也可以选择均梯度洗脱。
反相硅胶C18柱子，是极性大的物质先出来，然后是极性小的在出来，洗脱剂一般是水、乙腈、甲醇等，反相C18柱层析洗脱剂的选择我们是根据HPLC来定的，一般自己装的反相C18柱硅胶颗粒比HPLC的柱子填料大很多，为了得到好的分离效果，需要将HPLC的流动相的极性增大10%就可以了。如果条件允许用反相板也可以确定洗脱剂。
活性炭柱层析用的是颗粒状活性炭，一般是极性大的先出来，然后是极性小的。洗脱剂是甲醇、乙醇、水等，一般是先用水冲柱子，然后逐渐增加醇的比例洗脱就可以了。

2008-07-09 08:32

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cw0926

铁杆站友

3楼

至于凝胶柱层析我们没有用过，你可以在园子里搜索一下，这方面的资源也很多。

2008-07-09 08:34

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楼主

enyagao

入门站友

4楼

谢谢，看了你写的东西，让我知道了不少！谢谢你的指导！

2008-07-13 22:53

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