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蛋白质和糖学

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论坛首页  >  蛋白质和糖学技术讨论版   >  蛋白质组学
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【专题讨论】2D PAGE 实例分析(2D Troubleshooting) 第二波: 从样本制备到结果分析 [精华]

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sangyl
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solonye 兄真令人佩服,是我辈之楷模啊!
有一张胶图请您指教一下,是不是因为上样量太高才跑的这么烂啊。我跑的是植物蛋白,4-7的24cm胶条,上了1500μg样品,考染。期盼您的指导。
2008-07-08 15:06
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  • 37楼
楼主好,我也有两个图片希望指导一下。这个是今天跑的胶。17cm,PH4-7,上样量300ug,一向顺利升压,二向也没有问题。染色出来发现点是反着的,上方白色的很明显是我需要的蛋白质,但是却是白色的。其他地方一码黑。不清楚是怎么回事,希望指点。不甚感谢。我再把我跑的好的一张用来做对比,一并发上来。
今天跑的这个,是用的老以前的一瓶1X电泳缓冲液。不知道是否和这个有关。
2008-07-08 19:37
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  • 38楼
这个是以前相对成功的一张,对比着大家看一下吧,希望能找出原因。多谢各位!
2008-07-08 19:38
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xia0h 编辑于 2008-07-08 19:40
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zebrafishtom
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  • 39楼
Tris在裂解液的时候可以添加,但在水化液的时候尽量不要添加.
而且尽量用水化液将裂解液中的Tris浓度降低.因为Tris会严重影响pH梯度.
2008-07-08 20:17
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