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【讨论】HPLC出峰顺序和TLC斑点Rf值大小有关系吗？ [精华]

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楼主 xiaoyuxq
xiaoyuxq
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这个帖子发布于12年零187天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
昨天答疑出丑了，一直以为tlc斑点的顺序和hplc出峰的顺序是相反的，我到现在还是这样认为的。

但是大家看看大黄05版chp的含测，比较它的tlc鉴别。

tlc谢陪山教授主编的《中药薄层色谱彩色图集》1993版 大黄的斑点依次rf值从大到小：大黄酚、大黄素甲醚、大黄素、大黄酸、芦荟大黄素

tlc也直接说明了他们的极性大小顺序，我想，理论上也有解释的通。

而为什么hplc的顺序就不同了列？芦荟大黄素(1)、大黄酸(2)、大黄素(3),大黄酚 (4)和大黄素甲醚(5)

大家一起讨论一下原因！
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2008-05-26 19:48 浏览 : 17158 回复 : 52
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楼主 xiaoyuxq
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  • 2楼
补骨脂的也是一致的，不过只有2个组分，tlc图集上rf大的是异补骨脂素，小的是补骨脂素。

hplc “四神丸” 补骨脂素出峰时间小，异补骨脂素大
2008-05-26 19:57
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楼主 xiaoyuxq
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  • 3楼
厚朴也是一致的 tlc 厚朴酚rf值大，和厚朴酚rf值小

hplc 厚朴酚出峰时间大，和厚朴酚小
2008-05-26 20:01
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lwinna
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我想说的是没有直接的关系，除非你用的“流动相”都是一样的。
感觉你做的HPLC不是很多，或者没有自己建立过方法，我做的TLC也是屈指可数，没有形成自己的想法，所以我只说一下HPLC吧。
影响HPLC的出峰顺序的因素太多，不同药物的pKa不同，因此pH值的高低影响其存在形式，质子化与离子化的色谱保留差距较大，如果待测物质有几个出现交叉，其出峰顺序则发生变化。
另外流动相的溶剂强度、黏度等均可能使出峰顺序发生变化。

也就是大家在试验过沉重发现本来出现在前面的峰跑到后面的现象。
参考文献：不同流动相对峰位的影响
2008-05-27 10:44
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