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【讨论】HPLC出峰顺序和TLC斑点Rf值大小有关系吗？ [精华]

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楼主 xiaoyuxq
xiaoyuxq
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这个帖子发布于11年零247天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
昨天答疑出丑了，一直以为tlc斑点的顺序和hplc出峰的顺序是相反的，我到现在还是这样认为的。

但是大家看看大黄05版chp的含测，比较它的tlc鉴别。

tlc谢陪山教授主编的《中药薄层色谱彩色图集》1993版 大黄的斑点依次rf值从大到小：大黄酚、大黄素甲醚、大黄素、大黄酸、芦荟大黄素

tlc也直接说明了他们的极性大小顺序，我想，理论上也有解释的通。

而为什么hplc的顺序就不同了列？芦荟大黄素(1)、大黄酸(2)、大黄素(3),大黄酚 (4)和大黄素甲醚(5)

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2008-05-26 19:48 浏览 : 14763 回复 : 52
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wuqing1
wuqing1
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  • 5楼
lwinna
我想说的是没有直接的关系，除非你用的“流动相”都是一样的。
感觉你做的HPLC不是很多，或者没有自己建立过方法，我做的TLC也是屈指可数，没有形成自己的想法，所以我只说一下HPLC吧。
影响HPLC的出峰顺序的因素太多，不同药物的pKa不同，因此pH值的高低影响其存在形式，质子化与离子化的色谱保留差距较大，如果待测物质有几个出现交叉，其出峰顺序则发生变化。
另外流动相的溶剂强度、黏度等均可能使出峰顺序发生变化。

也就是大家在试验过沉重发现本来出现在前面的峰跑到后面的现象。
参考文献：不同流动相对峰位的影响

我认为就是“流动相”一样，也未必就有直接关系！
二者吸附、分离样品的原理是截然不同的
TLC原理是吸附剂对不同物质吸附能力不同；展开剂对不同物质溶解度不同，通过展开达到分离的目的。即混合液点在薄层板上时，吸附剂对不同物质有不同程度的吸附，在用溶剂展开时，因薄层上的毛细管效应，溶剂上升，当升到原点时，混合物溶解，溶解后随着不断上升的溶剂上移于原点之上，遇到新的吸附剂又被吸附，接着又溶解、解吸，使斑点不断上移。

液相原理是通过化学反应键合到硅胶表面，从而形成固定相。采用化学键合固定相的色谱法称为键合相色谱。若采用极性键合相、非极性流动相，则称为正相色谱；采用非极性键合相、极性流动相，则称为反相色谱。这种分离的保留值大小，主要决定于组分分子与键合固定液分子间作用力的大小。
只要明白二者的原理，就应该能找到二者之间的关系！
2008-05-27 14:14
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wuqing1 编辑于 2008-05-27 14:32
  • • 武汉肺炎疫情发展到了最关键时刻，救全国只剩一招，错过正月初十就晚了！
kissfires
kissfires
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  • 48楼
提问题就像是科研选题一样，不是简单的事；在工作中您的上司经常能依据你提的问题判断你的水平。
因为环境的不同，不同的人对同一件事情的理解往往会局限在不同的区域内，因此有了文化差异，但是在科学界，我们只有一个真理。
我们要做的就是突破人类感官环境甚至于想象力的局限，探索唯一的真理。

对于楼主所说的问题，就如lwinna战友所说：浪费时间；我也认为在某些角度来看是在浪费时间。
生活中我们常见一种现象，小朋友提的问题尽管咋听起来可笑，但是其中有些问题往往需要深入去思考。
就拿教科书上的色谱理论来说，这些理论都没有完全完善，有些甚至没有完全被确证，尽管它已经写入教科书中了。

以上发点牢骚，见笑！
其实在科学面前，我们哪个不是小朋友呢？
2008-07-22 21:23
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楼主 xiaoyuxq
xiaoyuxq
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  • 2楼
补骨脂的也是一致的，不过只有2个组分，tlc图集上rf大的是异补骨脂素，小的是补骨脂素。

hplc “四神丸” 补骨脂素出峰时间小，异补骨脂素大
2008-05-26 19:57
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