【求助】klenow酶补平的苦恼?急
这个帖子发布于 17 年零 102 天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
大家好,又要麻烦大家了.我用分步酶切法把我的质粒切出我的目的片段,并且用胶回收了,再用KLENOW酶来补平粘性末段,可是觉得我的补平不全.请问怎么样才能说明我的补平比较彻底的,还有我用的是NEB 的产品,体系如下:
DNA: 10UL
10XNEBbuffer2: 2ul
dNTP: 0.7UL
klenow: 1ul
ddH2O: 6.3UL
25度 温育15分钟
最后用75度 20分钟灭活klenow酶
DNA: 10UL
10XNEBbuffer2: 2ul
dNTP: 0.7UL
klenow: 1ul
ddH2O: 6.3UL
25度 温育15分钟
最后用75度 20分钟灭活klenow酶
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