【求助】如何在分离纯化中保护蛋白质的游离巯基？

我的蛋白上有一个Cys，本来这个蛋白很好纯化的，但很不幸的是纯化获得

的蛋白跑非还原电泳竟有两条带，二聚体带占了很大部分。我的这个游离

巯基还是很重要的，怎样才能在纯化的过程中避免两个分子间的巯基形成二

硫键的呢？ 谢谢！

我已经试过加巯基乙醇，效果有限，而且我的蛋白理论上不应该加巯基乙醇

或是DTT的。望有经验的兄弟指点迷津。