【求助】崩溃：为什么我的Elisa结果如此奇怪？！

高手请帮忙！
小弟做Elisa用间接法测试小鼠血清中的IgE抗体，设空白对照、和阴性对照、阳性血清稀释倍数为5千、1万、10万、20万不等，用的是生物素标记的羊抗鼠IgE抗体，和亲和素的辣根过氧化物酶，可是结果出来后除了空白对照孔没有颜色外，其余各孔全有颜色，而且OD值都相差不大，开始以为是污染可是连续重复N遍后结果还是这样，而且发现凡是有用抗原包被过孔全都呈现阳性，难道真的是污染造成的吗？如果真的是污染那为什么各个孔的OD值都很平均呢？为什么我测IgG就呈现良好的梯度呢？（注明：我测IgG用的是普通的二抗和辣根过氧化物酶，不是生物素的二抗和亲和素的辣根；另外我是手工洗板，每次甩完板后在滤纸上拍干）
是不是生物素二抗和亲和素辣根过氧化酶过于灵敏造成的污染呢？请教高手指点，如果是污染该怎样避免呢，请指教！（实验室没有洗板机）我已 经做了快10天了用尽了办法都是这样，实验又要赶进度，每天都在做无用功，真是急死人了！请指点！