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蛋白质和糖学
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蛋白质和糖学技术讨论版
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包涵体的洗涤问题
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lissazhang06
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丁当
1楼
这个帖子发布于
16年零307天
前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
请教各位大侠：我原核表达所得的包涵体无论用什么方法洗涤都无法除去杂蛋白，我是用洗过的和未洗的同时电泳，染色后发现没有一点差异，真是气死了。
还望各位高手不吝赐教！多谢！！！
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2004-03-30 11:00
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chromatography
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丁当
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2楼
通常的洗涤方法一般是洗不干净的，我以前是这么做的，先把包涵体用6M盐酸胍溶解充分，过滤除去未溶解的物质，注意留样跑电泳，然后用水稀释到4M,离心把沉淀和上清分别跑电泳，如此类推可以一直稀释到合适的浓度，你可以找到一个合适去除杂质的办法，其实这就是梯度沉淀的方法，我觉得比通常的直接洗脱效果好。
2004-03-30 11:30
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HPV疫苗到底该怎么打？最新临床应用中国专家共识出来了！（转载）
dynamo_lee
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3楼
包含体一般经过0.1%Triton x-100,0.02%脱氧胆酸钠，1mM EDTA, 2M尿素，每种溶液里面加0.5M NaCL
你可以摸索一个洗涤组合，看哪种洗涤的效果最好。
2004-03-30 13:16
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每天鼻塞流涕，一年四季“感冒”，这是为什么呢
楼主
lissazhang06
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4楼
4M的尿素我都试过，可是那些杂蛋白仍然无动于衷，呵呵，太顽固了。我的原核表达量不是很高，而我们同实验室的一个表达量很高，杂蛋白就很少，这两者是不是成反比的啊？
2004-03-30 14:48
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