【求助】sscp染色
发布于 2007-02-15 · 浏览 3341 · IP 湖北湖北
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我是一位刚刚做PCR-SSCP的研究生,第一次自己独立染色把胶的背景染得特别深,整个胶都是黑的,肉眼可以看见条带,可是照相时不能分辨，而且染色的过程中胶还粘在了染色盒子上(如下6步中第一遍碳酸钠时出现)，剥离时胶还破了一道口子(幸好没有影响到条带的位置)。我想在此请教一下原因是什么，应该如何杜绝这种现象的发生？谢谢！
注：我的PCR扩增产物为390bp，SSCP胶是用40%的PAGE（39：1）配的，最终浓度为16%。
染色过程如下：
1. 1%乙醇10分钟;
2. 1%硝酸5分钟;
3. 蒸馏水2次;
4. 0.2%硝酸银15分钟;
5. 蒸馏水2次;
6. 3%碳酸钠显色:第一遍快倒,第二遍条带出现,第三遍条带清晰;
7. 蒸馏水2次;
8. 1%冰乙酸2分钟;
9. 自来水洗3次.
注：我的PCR扩增产物为390bp，SSCP胶是用40%的PAGE（39：1）配的，最终浓度为16%。
染色过程如下：
1. 1%乙醇10分钟;
2. 1%硝酸5分钟;
3. 蒸馏水2次;
4. 0.2%硝酸银15分钟;
5. 蒸馏水2次;
6. 3%碳酸钠显色:第一遍快倒,第二遍条带出现,第三遍条带清晰;
7. 蒸馏水2次;
8. 1%冰乙酸2分钟;
9. 自来水洗3次.
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 3341
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