请教PET表达完整蛋白的酶切位点设计
按照PET说明,如果用NcoI(CCATGG)中的ATG作为目的基因的起始密码子就可以表达完整蛋白,我的基因开头序列为ATGAT。。。。,根据说明我想选择Bsa I(Eco31 I,酶切位点为5'-GGTCTC(N)1-3‘),是否我的5’引物序列应该为GGTCTCCCATGAT。。。,切开后为 CATGAT...,这样是否就能和Nco位点连接,在CATGAT中的A在连接的时候是否会突变为Nco I位点的G?,请教各位高手,谢谢!
按照PET说明,如果用NcoI(CCATGG)中的ATG作为目的基因的起始密码子就可以表达完整蛋白,我的基因开头序列为ATGAT。。。。,根据说明我想选择Bsa I(Eco31 I,酶切位点为5'-GGTCTC(N)1-3‘),是否我的5’引物序列应该为GGTCTCCCATGAT。。。,切开后为 CATGAT...,这样是否就能和Nco位点连接,在CATGAT中的A在连接的时候是否会突变为Nco I位点的G?,请教各位高手,谢谢!