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【求助】PFGE酶切总是不能完全切开

发布于 2006-04-30 · 浏览 1.4 万 · IP 广东广东
这个帖子发布于 19 年零 12 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
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小弟正在做PFGE测定基因组大小,现在遇到了一个及其头疼的问题,酶切总是不能完全切开.
我用的酶是生工的,酶切16小时.
1lane是MARKER,2是未酶切的plug对照,3到4分别是用不同的酶切的plugs.
电泳条件:two state:bio-rad mapper chef
time:22h;initial switch time:90sec;final swtich time:110sce;including angle:120;voltge:6v/cm
做了一个多月了,到酶切卡壳了.j急啊
望各位大侠们猛烈拍砖,多提宝贵以意见.
小弟在这先谢过了!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 具体酶切方法是:177ul的dd水+20的buffer+3ul的酶.酶总单位一共30U.在1.5mlEP管中37度温箱温育.
具体酶切方法是:177ul的dd水+20的buffer+3ul的酶.酶总单位一共30U.在1.5mlEP管中37度温箱温育.
具体酶切方法是:177ul的dd水+20的buffer+3ul的酶.酶总单位一共30U.在1.5mlEP管中37度温箱温育.

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最后编辑于 2006-07-17 · 浏览 1.4 万

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