【求助】TUNEL中能否用微波修复代替蛋白酶K
这个帖子发布于 19 年零 305 天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
各位前辈：大家好！我最近刚狠狠心买了罗氏的TUNEL试剂盒（中山），考虑到成本太高，一直不敢冒贸然做，现有几个问题请教：
1.一般TUNEL都用T BS冲洗吧！中山说可以用PBS代替，请问这俩者区别，这样代替吗？
2.中山提供了俩份说明书，一份自己曾做过而得出的经验书，上面提到在石蜡切片脱蜡至水后，直接用枸橼酸盐微波修复；而TUNEL试剂盒的说明书上说——先胃蛋白酶室温15－60min，冲洗。如果组织困难（这困难指什么啊？不懂），可以选用0.1M pH6.0的枸橼酸盐缓冲液进行修复，200ml需350W修复5min。我有点胡涂了，到底该怎么样做
3.呵呵，难为情啊，因为想省钱，所以只买了10张片子量的TUNEL，说明上说都要加50ul量，可我的是小鼠心肌（直径2mm左右），很小的一片，想问一下，我能加25ul吗？（免疫组化我都只加25ul的，不过结果不怎么样，我想和我偷工减料没关系吧）， 不知是否有人这样做过，如果大家觉得这样做不好的话，我还是会老老实实的加50ul的，毕竟代价比较大。
先谢谢各位了！
1.一般TUNEL都用T BS冲洗吧！中山说可以用PBS代替，请问这俩者区别，这样代替吗？
2.中山提供了俩份说明书，一份自己曾做过而得出的经验书，上面提到在石蜡切片脱蜡至水后，直接用枸橼酸盐微波修复；而TUNEL试剂盒的说明书上说——先胃蛋白酶室温15－60min，冲洗。如果组织困难（这困难指什么啊？不懂），可以选用0.1M pH6.0的枸橼酸盐缓冲液进行修复，200ml需350W修复5min。我有点胡涂了，到底该怎么样做
3.呵呵，难为情啊，因为想省钱，所以只买了10张片子量的TUNEL，说明上说都要加50ul量，可我的是小鼠心肌（直径2mm左右），很小的一片，想问一下，我能加25ul吗？（免疫组化我都只加25ul的，不过结果不怎么样，我想和我偷工减料没关系吧）， 不知是否有人这样做过，如果大家觉得这样做不好的话，我还是会老老实实的加50ul的，毕竟代价比较大。
先谢谢各位了！
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