[求助]【求助】流式检测细胞周期中细胞长期固定问题

因为实验室做流式的时间固定一周的两天，所以细胞只好收集起来固定几天后再做，可是具体的实验步骤搞不清楚，有人说可以用70％乙醇固定三周都没有问题。
给出的实验步骤如下：
1．收获细胞（约106细胞）。
2．细胞固定：用PBS洗涤细胞，800rpm离心，细胞重悬于100ul PBS，缓慢加入1ml 70～80%乙醇，充分混匀。4℃过夜。-70℃保存（～1周）。

可是有好些不明白，
1.细胞既然还要再离心，那么收获细胞的时候干什么要计数啊，而且如果要计数的话，在这个浓度下细胞要准备多少毫升哪？
2.有的说离心时要保持在4度，是必须的吗？
3.还有细胞准备好了之后是放在4度还是－70保存，放在EP管中可以吗？

询问了好些人都没有确切的说法，所以跑到这里了，恳求高手们的帮助，多谢了