各位前辈，小白目前在做QPCR实验，检测的是OCT4基因，实验开始时使用的引物是师姐设计的目标产物466bp，Ct在30左右，但是溶解曲线双峰，特异性不好，后来自己设计了引物，目标产物146bp，Blast结果显示很好，但是实验P不出来无扩增曲线，现在我怀疑是不是这个细胞不表达OCT4，请前辈指点，感激不尽！
不知道邀请谁？试试他们
第一次实验，目的片段466bp
第二次实验，无Ct值
先用普通PCR检测一下引物的特异性，第一对引物熔解曲线偏低，看看扩增出的是不是你的目的片段。
OCT4基因是主要表达于干细胞，维持细胞全能性；体细胞表达量可能非常低，无法检测到，无Ct值也属正常，需要确定一下你的细胞是否有OCT4表达。
