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动物与组织学技术

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论坛首页  >  实验动物与组织学技术讨论版   >  【免疫组化】
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关于石蜡切片免疫染色的问题

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1.请问有没有使用石蜡切片做CD31(ab28364)免疫荧光并且可以染得很好的呢，我试了酸修复，碱修复，微波修复，高压修复的各种排列组合，都没有成功，求支招

2.请问有没有试过同一批次的石蜡切片做DAPI 染色，有部分石蜡切片DAPI完全染不上色的情况，脱蜡方法为40min 60℃预热二甲苯，有什么改进方法呢？

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2019-08-26 23:30 浏览 : 2706 回复 : 10
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我有3只ab28364的，应该效果还行，这个抗体效价很低的，当时我做的时候是1:50,EDTA微波修复，lz是用多少浓度的，具体流程最好写仔细点，Dapi一般都很好染，同一批有好有坏应该不是脱啦的缘故
2019-08-27 12:02
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我有3只ab28364的，应该效果还行，这个抗体效价很低的，当时我做的时候是1:50,EDTA微波修复，lz是用多少浓度的，具体流程最好写仔细点，Dapi一般都很好染，同一批有好有坏应该不是脱啦的缘故

嘿您好，感谢您的回复。我的样品是历史遗留的小鼠心脏组织（蜡块存放了四年后切片后又放了2年），采用的方法就是常规脱蜡后试过枸橼酸微波修复，EDTA 微波修复，EDTA高压修复，之后CD31(ab28364）用的浓度是1:50，就是没有染出来，比较烦恼。另外就是同时做的冰冻切片DAPI（CST）染色都没有问题，石蜡切片就是有的能染上，有的不能染上，也是很诡异的。
2019-08-27 17:06
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我有3只ab28364的，应该效果还行，这个抗体效价很低的，当时我做的时候是1:50,EDTA微波修复，lz是用多少浓度的，具体流程最好写仔细点，Dapi一般都很好染，同一批有好有坏应该不是脱啦的缘故

嘿您好，感谢您的回复。我的样品是历史遗留的小鼠心脏组织（蜡块存放了四年后切片后又放了2年），采用的方法就是常规脱蜡后试过枸橼酸微波修复，EDTA 微波修复，EDTA高压修复，之后CD31(ab28364）用的浓度是1:50，就是没有染出来，比较烦恼。另外就是同时做的冰冻切片DAPI（CST）染色都没有问题，石蜡切片就是有的能染上，有的不能染上，也是很诡异的。

如果是片子切好后放了两年，肯定不行，蛋白大部分都降解了，一般切完片都一个月内做掉的，蜡块好点，但估计与空气接触部分也不行，lz蜡块组织多修掉些，再切几张试试
2019-08-28 09:13
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