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【经验】肺原位种植模型及肝转移模型建立

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楼主

daisychua

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1楼

这个帖子发布于4年零319天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。

关于肺癌的肝转移模型是在实验过程无意中发现的，经过几次条件优化和稳定后摸索出来的，于此处跟大家分享。
转移模型一：
细胞株：非小细胞肺癌A549
动物：5周龄健康裸鼠
先构建肺部原位种植模型，将状态良好的A549细胞消化，用PBS分散细胞悬液，离心后，加入基质胶（高浓度型），配比为50µl细胞悬液+50µl基质胶，其中细胞悬液中的细胞量为3*10⁶个。将裸鼠用氯胺酮麻醉，在显微操作台上，将裸鼠右侧胸部消毒，用手术剪剪开右侧胸部皮肤，一般情况下可以看见颜色浅于肌肉的随呼吸运动上下起伏的肺叶，如果视野不明朗，可是适当剪开肌肉暴露，用29-G的胰岛素针将准备好的A549细胞混合液，垂直进针，打入右肺中叶，进针深度约在5mm，推针速度尽量慢，全部推进去后可以轻轻压住进针处。然后进行缝合，缝合处消毒，待裸鼠苏醒后放回动物房。约14、15天可以肺部成瘤，约20天解剖可见肝部转移灶。
备注：基质胶要注意使用温度，保证在冰上进行，不要让它凝固。
转移模型二：
细胞株：非小细胞肺癌H1299
动物：5周龄健康裸鼠
先构建肺部皮下瘤模型，将状态良好的H1299细胞制成单分散细胞悬液，每只裸鼠接种100µl，约4*10⁶个细胞.约10天左后可见皮下有实性小瘤结节，约18天至20天左右解剖可见肝脏转移的白色瘤结节。病理可证实。
下图一是肺部原位肿瘤，下图二是模型一的肝转移，下图三是模型二的肝转移。