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蛋白质和糖学
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蛋白质和糖学技术讨论版
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请教关于细菌超声破碎的问题，急！
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zht
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丁当
1楼
这个帖子发布于
17年零166天
前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
在细菌超声破碎时有什么方法能简单准确地判断细菌已经完全破碎？苦于没有一个标准而无法判断表达的蛋白是形成了包含体还是细胞没有破碎完全。还有就是超声破碎会不会使可溶的目标蛋白形成沉淀？请各位高手不吝赐教。晚辈不胜感激。
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2003-09-26 14:54
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fruitsu
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丁当
2楼
我们实验室的经验是超声后菌液不粘稠，可认为破碎完全。然后在洗涤包含体的过程中收集各步的样品，经sds-page鉴定目的蛋白是以可溶还是包含体形式表达。超声条件合适的话，可溶性蛋白不会沉淀。如果条件太剧烈，如超声强度太大或时间过长，蛋白可能发生物理变性。
2003-09-26 15:49
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腹腔镜术中「钓鱼法」上提子宫技巧（视频）
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3楼
如果破碎不完全的话,你的样SDS电泳的时候,沉淀跑出来是连续的,许多地方连成一片,破碎完了,要小心电泳,再用新配的染色液和脱色液,染色和脱色,你的条带就会很漂亮.一般说来,破碎不回使可溶的蛋白沉淀.
2003-09-26 19:53
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重庆爱尔麦格眼科被举报套取医保基金：为冲业绩动员员工做手术
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丁当
4楼
超声包涵体的话，破碎完全后菌液应该呈现近似灰白色中透清，不是一开始的黄白色。用*头吸一些，一滴一滴滴下来时应该没有粘连。包涵体超声时间过长会出现焦化，即有些黑色。若包涵体表达量不高，超声时间长了可能会使目标蛋白溶解。
2003-09-27 15:39
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深圳无编制全科医生-每个月拿着1万块钱收入看着10万元/平方房价，心如死灰。
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