MSC 做transwell 实验细胞迁移不过去，求助一下大家

我是实验新手，刚做的transwell细胞迁移实验，结果小室的下层没有找到细胞，我把我的实验protocol说一下，希望那位实验前辈帮帮忙，不胜感激！

1.实验细胞：小鼠的二代MSCs 从培养皿上消化下来，按照4x104的细胞浓度接种到小室的上层。上层100ul，接种液用的是a-MEM培养基。

2.小室的下层溶液为600ul的含有10%的FBS的a-MEM,根据需要加入了20ng，50ng，200ng，500ng，1ug，2ug，5ug的rhBMP-2蛋白，老板说这个蛋白可能不太纯，让我先摸索一下浓度，看看BMP-2对MSC的趋化作用。

3.在37°培养箱培养了17 个小时。

4.我先吸走了小室内的液体，然后用棉签轻轻擦掉上层的细胞，然后把小室放在500ul的多聚甲醛中固定15分钟，然后取走小室，在0.2的结晶紫染色15分钟，在PBS中清洗掉结晶紫色素，然后镜下观察。

5.所有的组都没有迁移过来细胞，不知道是时间的问题，还是细胞问题，求各位前辈帮我分析一下，谢谢