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硝酸银染色法

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楼主

寿雪飞

神经外科

丁香园中级站友

1楼

这个帖子发布于18年零182天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。

1)10%乙醇，5 min；
2)双蒸水过水2次（短暂）；
3)1%硝酸，5min；
4)双蒸水过水；
5)0.2%硝酸银，在摇床摇动10 min；
6)双蒸水过水（不超过5sec）；
7)显影液显影，边晃动边显影，至显影满意为止；
8)10%冰乙酸固定，至无气泡；
9)40℃烘箱，3天；
10)剥离，保存。

Notes:显影液的配制：
无水碳酸钠3.09g
甲醛  100ul
硫代硫酸钠（1%）  10ul
双蒸水  100ml

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2002-10-17 00:17 浏览 : 11487 回复 : 8

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蓝兔子

铁杆站友

2楼

shouxf :
你用的银染方法为非二胺类银染法，还有二胺类银染法。
我写过一篇银染法的发展史的综述。

2002-10-17 13:18

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蓝兔子

铁杆站友

3楼

银染法分以下几个程序：
1、固定
2、敏化
3、银育
4、显影
5、停显
此外，其间还有数步的漂洗程序。
在你的银染方法中没有敏化过程，不过也中可以的，只是灵敏度会下降。
银染法还可分为碱性银染和酸性银染法，你的方法为酸性银染法。

2002-10-17 13:25

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颠牛

丁香园准中级站友

4楼

为何称为酸法？是指硝酸银这一强酸弱碱盐溶液因水解呈酸性而得名？
何为二胺类银染法？俺知道有银铵法，即在硝酸银溶液中加入氢氧化钠，银离子在氢氧化钠的作用下生成氢氧化银沉淀，后加入过量氨水，形成可溶的银铵络和物，而后者经甲醛还原为单质银颗粒。二胺法可是指此络和物为二铵盐？您这里的“胺”应为“铵”。
至于敏化作用，众说纷纭，且银染的灵敏度相当高，对常规分子生物学实验已是牛刀小用，敏化俺认为还是不用的好，因为对背景不利。
对于银染的研究在80年代的electrophoresis杂志中多有报道。

小经验：为便于控制显影速度，得到最佳的信噪比，银染的显影液温度不要过高，以10度左右为宜，高则易显影过度，背景深，低则显影时间长。

请兔子兄将您的大作上传，大家学习学习。

2002-10-17 22:17

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颠牛编辑于 2002-10-20 11:48

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