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有关软脂酸/软脂酸钠/棕榈酸/BSA/脂性培养基/FFA/游离脂肪酸的配置,包括无溶剂毒性、无固体析出的软脂酸/软脂酸钠/棕榈酸高脂细胞添加剂,欢迎交流与探讨!

屏蔽用户 · 最后编辑于 2018-03-29 · IP 陕西陕西
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icon优优行医 +5 丁当
这个帖子发布于 7 年零 188 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。

大家好,我是鲲创科技的联合创始人,我们团队长期从事2型糖尿病的研究工作。

2型糖尿病是一种以糖脂代谢异常为主要表现的慢性代谢性疾病。在体外研究中,为了模拟2型糖尿病所致的器官损伤,除在细胞培养基中添加高浓度的葡萄糖外,通常需要添加高浓度的软脂酸(棕榈酸,Palmitic acid)或软脂酸钠(棕榈酸钠,Sodium palmitate)。然而,现有配制方法不当,市场上也无可直接使用的软脂酸或软脂酸钠细胞添加剂,导致很多从事2型糖尿病的科研工作者无法顺利开展体外细胞实验。

现有技术中,有人采用甲醇、乙醇、氢氧化钠溶液等溶剂配制软脂酸或软脂酸钠,其缺点是这些溶剂本身对细胞就有毒性,而且这些溶剂是否影响软脂酸或软脂酸钠本身的性质也不清楚。也有有人利用牛血清白蛋白(BSA)可与软脂酸、或软脂酸钠结合的特点,采用高浓度的BSA溶液配制软脂酸、或软脂酸钠。上述方法的优点是溶剂本身对细胞无毒性,但仍存在以下问题:1.对BSA未进行甄选,导致其结合力不足;2.未掌握溶解软脂酸或软脂酸钠的合适条件,不能充分溶解软脂酸或软脂酸钠;3.配制的BSA-软脂酸、或BSA-软脂酸钠溶液很快有固体析出,不能有效发挥脂毒性。

我们的团队经过整整一年的研究和努力,发明了一种无溶剂毒性、无固体析出、可长期保存的软脂酸/软脂酸钠高脂细胞添加剂,并在细胞实验中成功验证和推广(Diabetes, 2017; Basci Res Cardiol, 2013),目前已与多个实验室确定了长期合作关系。

目前,团队希望在小范围内邀请大家试用该试剂,欢迎大家积极参与,我们会从中选出合适的用户,寄出试用装,让每一支试用装都能找到懂她的主人、使之物尽其用。共同推进2型糖尿病的科研工作,让相关研究更加便捷、稳定和出色。

如果需要请“投票、收藏、支持”该贴内容,感谢大家、也感谢丁香园提供的宝贵平台。

该高脂细胞添加剂试用装包括6mmol/L棕榈酸钠及其溶剂对照,可用于诱发细胞脂毒性、诱导内质网应激、氧化应激、线粒体损伤、细胞凋亡等,详情见参考文献。

1.      Ji L, Liu F, Jing Z, et al. MICU1 Alleviates Diabetic Cardiomyopathy Through Mitochondrial Ca2+-Dependent Antioxidant Response. Diabetes. 2017 Jun;66(6):1586-1600.

2.      Yan W, Zhang H, Liu P, et al. Impaired mitochondrial biogenesis due to dysfunctional adiponectin-AMPK-PGC-1α signaling contributing to increased vulnerability in diabetic heart. Basic Res Cardiol. 2013 May;108(3):329.

欢迎大家积极讨论和交流!

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应大家要求,将该高脂细胞添加剂诱导细胞凋亡的效果图附上,希望对大家的工作有所帮助。

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图1. 高脂细胞添加剂剂量依赖性诱导H9C2心肌细胞凋亡

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图2.高脂细胞添加剂剂量依赖性诱导内皮细胞凋亡

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常见问题汇总:

1、棕榈酸棕榈酸钠都可以用于研究脂毒性对骨骼肌细胞、心肌细胞的影响,同时也适用于诱导内质网应激、化应激、线粒体损伤、细胞凋亡等。

2、该高脂细胞添加剂对细胞无毒性,同时提供了对照溶液

3、该高脂细胞添加剂浓度为6mmol/L的棕榈酸钠

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好消息,应多位伙伴要求,团队研发人员进一步优化条件,提升了棕榈酸钠的浓度:

将棕榈酸钠的浓度由6mmol/L提高至10mmol/L,提升幅度接近100%!!!

欢迎大家交流、祝所有看到的伙伴实验顺利!

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溶剂不含任何影响细胞生长或代谢的成分,建议增加空白对照。

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