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【求助】相差14个bp的片断，用琼脂糖能跑出来么

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楼主

linhuizhongbbc

入门站友

1楼

这个帖子发布于14年零48天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。

相差14个bp的片断，用琼脂糖能分得开么，不知道有没有人跑出来过？

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2005-10-28 23:15 浏览 : 3445 回复 : 11

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sword20000 编辑于 2005-10-29 10:08

• 丁香热议——第一次遇见同行医闹，威胁我说认识院长要投诉！

ligzh2003

常驻站友

2楼

个人经验，很难区分开来，建议应用PAGE胶（聚丙烯酰氨胶）跑，这样就可以区分开来！

2005-10-28 23:29

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• 肺不张伴钙化

楼主

linhuizhongbbc

入门站友

3楼

多谢指教，只是觉得用PAGE胶太麻烦了，如果琼脂糖能跑出来最好了，呵。

2005-10-29 00:03

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wacsd999

生化室

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4楼

您好!
建议发贴前搜索一下园子,这样的问题有很多!以下是解释!

100以上的片断可以用琼脂糖凝胶电泳分离开
100以下的片段，用聚丙烯酰胺凝胶电泳
聚丙烯酰胺凝胶和琼脂糖凝胶浓度与DNA分子的有效分离范围如下，以后再做时可以参考，希望有所帮助。
凝胶胶浓度(%) 线形DNA分子大小
聚丙烯酰胺凝胶 3.5 100-2000bp
5.0 80-1000bp
8.0 60-400bp
12.0 40-200bp
20.0 6-100bp

琼脂糖凝胶 0.3 5-60kp
0.6 1-20kp
0.7 0.8-10kp
0.9 0.5-7kp
1.2 0.4-6kp
1.5 0.2-4kp
2.0 0.1-3kp
注意：聚丙烯酰胺凝胶浓度低于2.4%不能凝结，可加入一定量的琼脂糖辅助成胶，例如2.2%的聚丙烯酰胺凝胶与0.7%琼脂糖混合，可分离150bp-5.7kp的DNA。
同时还要注意电泳缓冲液的配制,要新鲜,电泳电压要控制好!
祝君实验顺利!

2005-10-29 00:40

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wacsd999 编辑于 2005-10-29 00:42

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