求助：PAGE电泳带特别淡，请教

收集菌液沉淀，加水溶解后，加入4*SDS buffer，沸水煮5min，取大约7微升加样，用的是bio－rad仪器，100v 2h 待溴芬兰跑出胶时停止电泳，考马斯亮兰染色过夜，脱色。
第一次出现这种情况后，加大菌液量再做，但结果改善不明显。
我是新手，请各位大侠指教。