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手把手教你使用Imagepro-Plus(6.校正标尺) [精华]

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楼主

hbchendl

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丁香园准中级站友

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1楼

这个帖子发布于15年零306天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。

这是本系列主题的第六帖。如果你是第一次阅读这个系列主题，请从第一帖开始:
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=10&id=3554359&sty=1&tpg=1&age=0
校正标尺的作用有二：
一是把图片几何数据的象素单位转换成实际的长度单位，这样可以得到实际的几何尺寸测量数据。
二是在图片上标上一个长度标记。
在你打算学学一标尺的操作并自己动手在自己电脑上玩玩标尺之前，要确认自己是要动真格地学会怎样设置这些东东。因为一旦标尺设置错误了，以后所有的几何测量数值都会出错的。而且不会因为你关闭程序或关闭电脑就能Reset了。如果你因为在这里学着定标尺而搞乱了你的IPP程序，可别埋怨我。

在前面的帖子中我一直没提及标尺。因此在提到测量面积直径等几何尺寸时都用象素作为单位。如果你需要测量微观物体的准确几何尺寸，那就得进行标定操作后才行。
还有一个需要标定的是光密度。这可就比几何标尺困难多了。在分析光密度参数时，较正光密度曲线是必须要作的。否则在进行灰度分析时肯定会出错。我在后面重新写了一个相关的帖子。不过本论坛里曾有人讨论过相关的内容。

标定标尺还需要有个物质准备，就是得有一个叫"微标尺"的小玻璃片。上面刻有准确的刻度，在1MM的长度上刻着100个分度刻度，这样这个小尺的每一格就是0.01MM。得在专业的显微镜生产商那才能买到，或者在买显微镜时把这个当作附件给买下来（就是有点贵，实际上，那是相当地贵）。
如果没有这玩艺怎么办?还真有点难办。照理说如果有一个能放在载片上的尺寸已知的小东西也是可以的，这个东西首先得足够小，其次得准确知道它的尺寸。我现在能够想到的东西就是血球计数板。它的尺寸就是1平方毫米，分了几个大格和小格，大家可以自己算一下或者查一下这些线条的间距。线条精度虽然比不上微标尺，但误差也不会太大。可以凑合着用。
上面说的是使用显微镜照片时用的标尺。如果你处理的是大个物体的照片，那就在物体边上放个米尺就行了。在拍摄物体的同时也把米尺的图象拍下来。

使用标尺来标定几何尺寸的方案是这样的:
先用显微镜拍摄下微尺的图象。
再用显微镜拍摄下样品显微图象。
最后用微尺的图象来"量"样品图象的几何尺寸。
在IPP中，程序先记住1MM相当于多少象素，然后测量样品图象的几何尺寸时只要先算出象素值，一换算就得了。

最重要的一点就是，现在的数码相机都有无级变焦，可以任意放大缩小画面。因此要特别注意，在显微镜下拍摄微尺图象与拍摄样品图象时，绝对不能调节相机的变焦(ZOOM)。

显微镜一般都有4倍、10倍、40倍、100倍甚至更多物镜。可以分别用这些物镜拍摄下不同的微标尺图象，在处理不同物镜下拍摄的照片时使用各自对应的标尺。
具体的操作步骤如下:

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2005-06-13 18:34 浏览 : 67045 回复 : 101

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hbchendl 编辑于 2007-03-07 21:46

• 微塑料成为病原体和抗药性细菌的“中心”

nebular

丁香园准中级站友

2楼

鼓掌
学习中

2005-06-13 20:09

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• 微塑料成为病原体和抗药性细菌的“中心”

楼主

hbchendl

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丁香园准中级站友

3楼

使用标尺的第一步就是拍摄微标尺的照片。拍一张是不行的。
如果你的显微镜有4个物镜分别是4X、10X、40X、100X。那么就要分别拍摄下这四个镜头下的标尺图象。
如果你的像机是非变焦镜头，还不错。不用管变焦的事。我的相机有五级变焦，其中光学变焦三级，数字变焦两级。而三级光学变焦中，两个短焦距变焦拍摄的图象亮度不均匀，不能用。数字变焦不予考虑。因为我固定使用一个焦距。否则每个变焦都要拍摄标尺照片。
数码相机拍摄画面还有不同象素。分别是低、中、高三个档次。三种象素画面大小是不同的，因此也要分别拍摄它们的标尺图片。
4个镜头，五种变焦，三种象素。共需拍摄4*5*3=60张不同的标尺图片。
我偷懒，只拍摄4种镜头下各自的标尺照片，相机变焦与象素选择都只用一种。
如果你的相机是无级连续变焦的，可得小心，得固定一个变焦值。
图中分别是100X、40X、10X物镜下的微标尺照片。