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PCR技术

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论坛首页  >  PCR技术讨论版   >  PCR/RACE/RNA-Seq
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重叠PCR,有人知道这个吗?三段DNA重叠

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楼主 钢琴251
钢琴251
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这个帖子发布于4年零101天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。

我做重叠PCR进行点突变,三段分别A,B,C段,全部用前面的野生质粒进行扩增,都得到了相应的条带,然后将A和B段

融合,也成功了,但现在遇到A+B与C段再融合,两端引物加的是质粒的通用引物,就是不出目的条带,大家知道是怎

么回事吗?

A: 500bp

B: 700bp

C: 200bp

退火温度用的57℃,用的高保真酶,一步法和两步法都试过未成功。

大家有在的吗?

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2016-10-09 21:58 浏览 : 1553 回复 : 6
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楼主 钢琴251
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大家这时候都在吗?实在没思路了,谁能指点一下。

2016-10-09 21:58
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楼主 钢琴251
钢琴251
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来救一下帖子,谁有经验吗? 

2016-11-17 09:10
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MAAAYUUU
MAAAYUUU
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您好 请问你做出来了么?? 
2017-12-06 19:30 来自 iPhone/iPad客户端
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