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重叠PCR，有人知道这个吗？三段DNA重叠

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楼主

钢琴251

入门站友

1楼

这个帖子发布于3年零104天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。

我做重叠PCR进行点突变，三段分别A,B,C段，全部用前面的野生质粒进行扩增，都得到了相应的条带，然后将A和B段

融合，也成功了，但现在遇到A+B与C段再融合，两端引物加的是质粒的通用引物，就是不出目的条带，大家知道是怎

么回事吗？

A: 500bp

B: 700bp

C: 200bp

退火温度用的57℃,用的高保真酶，一步法和两步法都试过未成功。

大家有在的吗？

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2016-10-09 21:58 浏览 : 1354 回复 : 6

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楼主

钢琴251

入门站友

2楼

大家这时候都在吗？实在没思路了，谁能指点一下。

2016-10-09 21:58

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楼主

钢琴251

入门站友

4楼

来救一下帖子，谁有经验吗？

2016-11-17 09:10

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MAAAYUUU

入门站友

5楼

您好请问你做出来了么？？

2017-12-06 19:30 来自 iPhone/iPad客户端

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